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TINCION DE PAPANICOLAU

INTRODUCCION • El método Papanicolau para colorear extendidos cervicales es usado desde hace aproximadamente 50 años en todo el mundo. • Consiste en el uso de un colorante nuclear (hematoxilina) y colorantes citoplasmáticos que compiten entre si permitiendo una tinción policomatica.

Es el método de tinción mas utilizado para material citológico. La coloración de Papanicolaou es la técnica por excelencia de la citología general como la hematoxilina eosina lo es para el método histológico

Tinción Papanicolaou

 Tinción de rutina elaborada por el Dr. Georges Papanicolaou, tienen un valor práctico en la diferenciación celular tanto citoplasmática como nuclear y sus modificaciones.  Para este método se necesitan 3 soluciones especificas: Hematoxilina de Harris Orange 6 (OG6) Eosina Azur 36, 50 ó 65 (EA-50)

• Para la Coloración de Papanicolaou es necesario que los preparados sean previamente fijados en alcohol 96º.

• La coloración de Papanicolaou es un método basado en la diferenciación de color de los diversos componentes celulares, se aplica a los diversos tipos celulares para el diagnóstico de cambios malignos y la tipificación celular. Los núcleos son coloreados con la Hematoxilina de Harris (coloración básica), el citoplasma con un colorante de naturaleza alcohólica y policromática: coloración de Eosina (coloración ácida); y la queratina citoplasmática, cuando está presente, se colorea con Orange G.

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Colorante de Hematoxilina a. Hematoxilina b. Oxido de Mercurio (amarillo) c. Sulfato doble de Aluminio (Amonio) y Potasio • d. Alcohol corriente al 96% • e. Agua destilada

• Colorante. Elementos celulares. • Hematoxilina de Harris. Afinidad por la cromat ina.Tiñe el núcleo. • OG 6 Tiñe la queratina.Penetra rápidamente al citoplasma. • EA 50 Tiñe el citoplasma de las célulasescamos as cianofílasy eosinofílas.Nucléolos y cilios.

• Colorante Orange G 6 • - Cristales de Orange G 6 13 INSTITUTO NACIONAL DE SALUD • - Acido Fosfotúngstico • - Alcohol corriente al 96% • - Agua destilada

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Colorante EA 36 - Eosina amarilla - Marrón Bismark - Verde Claro S.F. - Carbonato de Litio - Acido Fosfotúngstico - Alcohol corriente al 96% - Agua destilada

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Colorante de Eosina - Eosina amarilla - Dicromato de Potasio - Acido Pícrico - Alcohol corriente al 96% - Agua destilada

• RESULTADOS DE TINCION • 5.7.1. Núcleos: La cromatina y la membrana nuclear toman el color azul oscuro o púrpura mientras el nucléolo • obtiene el color rojo, rosado o naranja. • 5.7.2. Citoplasma: Adopta el color amarillo o naranja, si hay presencia de queratina. Caso contrario el color varía de • verde, azul o gris.

Tinción de Papanicolaou

Hematoxilin a de Harris

Coloración Tricrómica

EA 50

Orange G

Hematoxilina de Harris • 2 soluciones Stock: – Solución A: Hematoxilina al 10% en alcohol.

– Solución B: Alumbre de potasio al 10% en agua destilada.

+ óxido de mercurio

Orange G • Colorante ácido debido a la presencia de grupos sulfónicos • Bajo peso molecular • Tiñe: – Células maduras – Células con hiperqueratosis

Los citoplasmas sin queratina no retienen el colorante.

EA 50 • Compuesto por: – Eosina – Verde Luz – Pardo bismarck • Tiñe de rosado (eosinófilas) las estructuras más diferenciadas de los citoplasmas. Las menos diferenciadas son teñidas con el verde luz, desplazando a la eosina y quedando teñidas de color azul ( basófilas).

Muestra citológica cervicouterina. Tinción Papanicolaou observada con un aumento de 4x.

Muestra citológica cervicouterina. Tinción Papanicolaou observada con un aumento de 10x