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“Año de la Consolidación del Mar de Grau” “Decenio de las personas con Discapacidad en el Perú 2007-2016”

USO DE UN MICROSCOPIO OPTICO COMPUESTO PARA INVESTIGAR LA ESTRUCTURA DE CÉLULAS Y TEJIDOS Alumna: Leonela Marbella Castañeda Hernández. Docente: Edwin Cerna Villalobos. Grado y sección: 4° Ciencias “A”.

COAR-Tacna

2016

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USO DE UN MICROSCOPIO OPTICO COMPUESTO PARA INVESTIGAR LA ESTRUCTURA DE CELULAS Y TEJIDOS OBJETIVOS:   I.

Reconocimiento de las partes del microscopio óptico compuesto. Reconocimiento de las partes de la célula. INTRODUCCION La célula es la unidad más pequeñas que puede realizar todas las actividades de la vida, su organización y tamaño son críticos para el mantenimiento de la homeostasis y su tamaño y forma se adaptan para cumplir esa función. La célula en sí misma es un sistema biológico muy complicado, donde grupos de células conforman tejidos, órganos y organismos. (Solomon, Berg, & Martin, 2013, pág. 74) Existen dos tipos distintos de células: las procariotas y las eucariotas. Las células eucariotas aparecieron en una época reciente, y son las más evolucionadas a diferencia de la procariotas. Por ser un tamaño muy pequeño, las células y las estructuras subcelulares necesitan de microscopios para poder ser observadas por el ojo humano, de limitado poder de resolución. Los tres tipos principales son el microscopio óptico, el microscopio electrónico de transmisión y el microscopio óptico de barrido. (Curtis, Barnes, Schnek, & Massarini, 2008, pág. 74) El microscopio es un instrumento que sirve para ver objetos demasiados pequeños para ser vistos con claridad por el ser humano; en otras palabras es aquel instrumento óptico que permite ver objetos aumentados. El termino microscopio surge en el siglo XVII y deriva de las palabras griegas mikrós (pequeño) y skopéoo (observar). Este aparato fue un gran descubrimiento cuando fue utilizado por primera vez por el holandés Anton Van Leeuwenhoek el año 1675. Los microscopios básicamente se componen de una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. Por lo tanto, se considera que los microscopios cuentan con dos secciones, una óptica, que sirve para observar, y la otra, que es una parte mecánica, la cual es la que sostiene a la primera. (QuimiNet, 2011). Por lo general los microscopios se utilizan en entornos clínicos y biológicos, por lo tanto, están más relacionados con la ciencia y medicina. En esta presente práctica utilizaremos el microscopio óptico compuesto, que nos ayudara a identificar células eucariotas, tales como, células animales y células vegetales.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:  

¿Será posible identificar eficazmente la estructura de células y tejidos utilizando el microscopio óptico compuesto? ¿Cómo se puede realizar el reconocimiento de las partes de la célula?

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II.

DISEÑO 2.1. Hipótesis 

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III.

Sí es posible identificar eficazmente la estructura de células y tejidos, ya que el microscopio óptico compuesto consta de diferentes aumentos. El reconocimiento de las células se da a través del microscopio óptico, usando el tornillo macrométrico, para subir y bajar la platina rápidamente con los objetivos de 4X y 10X, garantizando así un enfoque; además también se usa el tornillo micrométrico, para bajar y subir la platina lentamente y se realiza con todos los objetivos para garantizar mayor nitidez.

METODOLOGIA 3.1. Materiales e instrumentos 3.1.1. Material biológico  Hígado de pollo  Cebolla (Allium cepa)  Plátano (Musa × paradisiaca)  Sangre Humana 3.1.2. Material de vidrio  Lamina portaobjetos  Laminilla cubre objetos  Vidrio de reloj 3.1.3. Instrumento  Microscopio óptico compuesto (Zeizz) 3.1.4. Colorantes  Azul de metileno  Lugol 3.1.5. Otros materiales  Capsula de porcelana  Navaja Gillet  Alcohol  Algodón  Papel higiénico  Aguja (tuberculina)  Tubo capilar  Aceite

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3.2. Procedimientos 3.2.1. Reconocimiento de las partes del microscopio óptico compuesto  Se buscó información sobre las partes del microscopio en el libro Allot.  Se manipuló y analizó las partes del microscopio óptico compuesto en el laboratorio. 3.2.2. Preparación de las muestras biológicas 3.2.2.1. Plátano (Musa × paradisiaca)  Se retiró la cascara del plátano.  Se realizó un corte fino de la pulpa del plátano utilizando la Gillet.  Se colocó la muestra sobre la lámina portaobjeto.  Se agregó una gota de azul de metileno.  Se colocó la laminilla cubreobjeto, y se procedió a uniformizar la preparación con la ayuda de las yemas de los dedos y papel higiénico.  Al final llevamos la preparación y la colocamos sobre la platina del microscopio óptico compuesto. 3.2.2.2. Cebolla (Allium cepa)  Se retiró una membrana, llamada catáfila de la cebolla.  Se colocó la muestra sobre la lámina portaobjeto.  Se agregó una gota de azul de metileno.  Se colocó la laminilla cubreobjeto, y se procedió a uniformizar la preparación con ayuda de papel higiénico, y la yema de nuestros dedos.  Al final llevamos la preparación y la colocamos sobre la platina del microscopio óptico compuesto. 3.2.2.3. Hígado de pollo  La señorita de laboratorio nos designó hígado de pollo, que anteriormente había sido comprado de un mercado.  Retiramos una pequeña parte del hígado recién cortado por la mitad.  Se colocó la muestra sobre la lámina portaobjeto.  Se agregó azul de metileno sobre la muestra.  Se colocó la laminilla cubreobjeto, y se procedió a uniformizar la preparación con ayuda de papel higiénico y la yema de nuestros dedos. 3.2.2.4. Sangre humana  Se desinfectó la zona de extracción de la sangre con algodón y alcohol.  Se hizo una abertura al tejido epitelial de la yema del dedo con la ayuda de una aguja tuberculina. 4

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Se presionó el dedo de la zona de la extracción de la muestra y se procedió a recolectar la sangre con el tubo capilar. Se realizó la técnica del frotis o extendido. Dejamos secar la muestra Se añadió el colorante Writh sobre la muestra, y este también se dejó secar por 5 minutos. Se eliminó el colorante y se lavó con agua de caño Nuevamente se dejó secar la preparación y se le agregó el aceite de inmersión. Se trasladó la muestra al microscopio, dejando que el aceite de inmersión tenga o con el objetivo (100x).

3.2.3. Observación de las estructuras celulares  Antes de colocar la muestra sobre la platina. Nos aseguramos que la platina este en el tope y para ello usamos el tornillo macrométrico.  El objetivo que apuntó al condensador fue el de menor aumento (4x).  Colocamos la muestra sobre la platina.  subimos la platina con el tornillo macrométrico.  Centramos la muestra, de tal manera que la luz que proviene del condensador y el objetivo apunten hacia ella.  Después cambiamos el lente objetivo por el de 10x, y para garantizar mayor nitidez utilizamos el tornillo micrométrico.  Finalmente dibujamos en un cuaderno de apuntes las estructuras observadas a través del microscopio óptico compuesto. 3.3. Normas de seguridad En primer lugar, cuando ingresamos al laboratorio nos asignaron batas a cada estudiante, para evitar algún teñido en nuestra ropa; previamente antes de empezar con la práctica, todos los estudiantes se colocaron sus materiales de laboratorio, tales como, mascarilla, guantes de látex y gorro (mantuvo nuestro cabello recogido). Asimismo nadie podía manipular distintos materiales sin la autorización del docente o la ayudante de laboratorio. También todos mantuvimos el orden y fuimos cuidadosos al momento de utilizar el microscopio óptico compuesto, como por ejemplo, al momento de enchufar el microscopio, verificamos que nuestras manos estén secas. Además cuando se obtuvo la muestra de sangre, la señorita especialista utilizó unos guantes y desinfectó el área de donde se extraería la muestra sanguínea. Asimismo respetamos los turnos para ver las células vegetales y/o animales en el microscopio. Por otro lado respetamos la ética en todo momento, puesto que los materiales biológicos, tales como el plátano, la cebolla y el hígado de pollo, fueron conseguidos de un mercado, lo cual lo utilizamos como alimentos en nuestra vida diaria, es decir, es un sustento vital para todos nosotros; la sangre humana fue donada por un adulto de manera voluntaria.

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IV.

ANALISIS 4.1. Análisis de datos

Muestra: Plátano

Muestra: Cebolla

Tipo de célula: Vegetal

Tipo de célula: Vegetal

Aumento: 400x

Aumento: 400x

Estructura observadas:

Estructura observadas:

Muestra: Sangre Humana

Muestra: Hígado de pollo

Tipo de célula: Animal

Tipo de célula: Animal

Aumento: 400x

Aumento: 100x

Estructura observadas:

Estructura observadas:

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Muestras de: 

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

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V.

Plátano (Musa × paradisiaca): en las muestra de plátano se observaron muchas células, cada una de ellas con su respectivo núcleo, asimismo se observaron los amiloplastos, gránulos de almidón en forma de vesículas, la célula se tiñó color amarillo claro debido al tinte que se utilizó (lugol). Cebolla (Allium cepa): en esta muestra observamos las células de la cebolla con una forma hexaédrica (en celdas) y alargadas, y con ayuda del azul de metileno se pudo distinguir mejor las partes de la célula, es decir se pudo diferenciar el citoplasma y lo que es la membrana celular, además del núcleo, por otro lado debido al tinte que se utilizó (azul de metileno) las células adquirieron una coloración celeste muy claro. Según Montes, A., en el año 2013, en un experimento que realizó, mencionó que pudo distinguir las mismas estructuras que encontramos en esta práctica de laboratorio, dichas estructuras eran pared celular, citoplasma y núcleo. Además en el año 2015 se realizó otro experimento de citología por el profesor Turégano, J., quien observó que las células de cebolla son alargadas y poligonales (forma hexaédrica). Hígado de pollo: en esta muestra se observaron muchas células de hígado con sus respectivos núcleos, también se observaron membranas y con la utilización del colorante azul de metileno las células tomaron un color entre morado claro y rosado claro. Sangre humana: en esta muestra se pudieron observar los glóbulos rojos en forma de disco bicóncavo y adquirió una coloración entre morado y rosado claro debido al tinte (Writh) que se utilizó. En el experimento que se realizó en el año 2015 por Montes, A., se dio a conocer que se observaron en el microscopio los leucitos (glóbulos blancos) y eritrocitos (glóbulos rojos) en las células sanguíneas; también especificó que con el objetivo de 4x, pudo observar los eritrocitos en forma de discos bicóncavos y bien agrupados. CONCLUSIONES Se confirma la hipótesis, debido a que, a través del microscopio óptico compuesto se pueden observar diferentes tipos de muestra usando los distintos tipos de objetivos (4x, 10x, 100x y 400x), lo cual se ve respaldado por resultados obtenidos y las bases teóricas anteriormente dichas, como la que se indicó en la introducción, las células debido a su tamaño necesitan del uso de un microscopio para poder ser visualizadas por el ojo humano. Asimismo con la ayuda de los tornillos macrométrico y micrométrico se pudo bajar y subir la platina para garantizar un enfoque correcto de la muestra. Dentro de las limitaciones que se presentaron en la práctica fueron: la lámina cubreobjetos era muy grande, también al momento de identificar las células muchas veces nos confundíamos con las burbujas, lo cual indicó que la obtención de la muestra no se llevó de una manera adecuada, porque caso contrario las burbujas no se deberían de ver en el microscopio. Además las láminas estaban grasosas, y para limpiarlas se utilizó papel higiénico, en vez de tela nansú. Por otro lado cuando nos acercábamos al ocular para ver las células, en muchas ocasiones nuestras pestañas tenían un ligero o con el ocular lo cual provocaba que este se ensucie, y de esa forma tener una mala experiencia y errores en la práctica. 7

Sin embargo como todo equipo también tuvimos nuestras fortalezas, tales como, todos contamos con una guía de práctica, también contamos con el libro “Allot”, el cual nos sirvió de mucha ayuda, puesto que pudimos reconocer las partes del microscopio, además de saber cómo se realizaba una preparación de muestras (células y/o tejidos) . Asimismo todos tuvimos la habilidad para enfocar las muestras. Por otro lado aprendimos de nuestras debilidades, pues la experiencia científica que ya tuvimos nos dirá que lo observado es una célula y no una mancha o burbuja, lo cual nos servirá cuando tengamos otra práctica similar a esta, de identificación de células y tejidos a través del microscopio óptico. Respecto a las sugerencias de mejora, sería conveniente utilizar otros tipos de microscopios para identificación de células, también deberíamos utilizar otros tintes a parte del lugol y el azul de metileno, asimismo se deberían observar las estructuras celulares de otras células eucariotas y procariotas. Además sugiero que cuando no se esté utilizando el microscopio, este debe permanecer con su respectiva funda para que sus lentes no se ensucien, ya que debemos de pensar en nuestros compañeros de los grados inferiores.

VI.   

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS Ciencias Naturales. (2008). Obtenido de Ciencias Naturales: http://www.areaciencias.com/El_Microscopio.htm Curtis, Barnes, Schnek, & Massarini. (2008). Biologia (Séptima ed.). Buenos Aires, Argentina: Editorial Médica de Panamericana. Montes, A. (28 de Octubre de 2013). Obtenido de http://es.slideshare.net/alfredomontesrobledo/observacin-de-clulas-animalessanguneas-epiteliales-humanas-vegetales-y-diferencias-citoplasmticas-en-las-cienciasbiolgicas Montes, A. (28 de Octubre de 2013). Observación de células animales, sanguíneas, epiteliales humanas, vegetales y diferencias citoplasmáticas en las ciencias biológicas. . Obtenido de Observación de células animales, sanguíneas, epiteliales humanas, vegetales y diferencias citoplasmáticas en las ciencias biológicas. : http://es.slideshare.net/alfredomontesrobledo/observacin-de-clulas-animalessanguneas-epiteliales-humanas-vegetales-y-diferencias-citoplasmticas-en-las-cienciasbiolgicas QuimiNet. (13 de Enero de 2011). Obtenido de QuimiNet: http://www.quiminet.com/articulos/los-principales-usos-y-aplicaciones-de-unmicroscopio-47241.htm Solomon, E. P., Berg, L. R., & Martin, D. W. (2013). Biología. (Novena ed.). México D.F: CENGAGE Learning Editores. Turégano, J. C. (2 de Noviembre de 2015). Células Vegetales, Epidermis de la Cebolla. Obtenido de Células Vegetales, Epidermis de la Cebolla: https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com/2014/11/02/practica-2/

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