Urocultivo 2 6s1a4c
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- Words: 2,386
- Pages: 32
UROCULTIVO
La infección de vías urinarias (IVU) es una de las infecciones bacterianas más frecuentes en mujeres (recto mas cerca de la uretra y más corta) y su espectro va desde una bacteriuria asintomática a una pielonefritis aguda (PNA).
El Urocultivo debe realizarse cuando hay signos de infección urinaria. Insuficiencia renal.
Agentes etiológicos causantes de IVU: Escherichia coli, Enterococcus, Klebsiella, Enterobacter, Proteus sp., Pseudomonas, Serratia, Citrobacter y Streptococcus pyogenes.
Las infecciones del tracto urinario pueden ser producidas por agentes etiológicos especifico y raras veces por una flora mixta. Es muy importante entonces llevar a cabo estudios cuantitativos de bacterias viables en la orina.
Las infecciones de vías urinarias se desarrollan como consecuencia de infecciones exógena ó por vía ascendente que por endógenas o provenientes de otras partes del organismo, tales como septicemias o bacteriemias.
Escherichia coli causa el 80% de las IVU
FACTORES PREDISPONENTES DE IVU:
• Falta de higiene •Vaciamiento incompleto de vejiga durante micción •Cateterismo uretral prolongado • Diabetes • Hipertensión arterial • Inmunosupresión • Uropatía obstructiva • Alteraciones neurogénicas de la vejiga
Infección en riñón o migrar a sangre
Compromiso de la vida del paciente
Microorganismos Patógenos
Escherichia coli
Uropatógena (UPEC)
Klebsiella pneumoniae Proteus Staphylococcus Serratia maurcescens Pseudomonas aureuginosa Enterococcus faecalis
80-90%
5-10 %
5-10 %
TOMA DE MUESTRA: La orina normalmente es un líquido estéril, porlo cual es importante colectarla adecuadamente, ésta puede contaminarse con microorganismos de la flora normal del periné, la próstata, la uretra o la vagina.
TIPOS DE COLECTA: • • • • • •
CHORRO MEDIO DE ORINA EMITIDA EXPONTANEAMENTE CHORRO MEDIO DE ORINA CATÉTER VESICAL (no de rutina) POR PUNCIÓN (ASPIRACIÓN) SUPRAPÚBICA DE LA VEJIGA (infantes) POR CITOSCOPIA POR SONDAS FLOLEY (no recomendados para cultivos)
TOMA DE MUESTRA:
•
Obtener las muestras en la mañana (1er orina del día)
•
No forzar la ingesta de líquidos
•
Tres muestras para pacientes asintomáticos.
•
Limpieza de las zonas cercanas a la uretra
•
Orinar en el frasco estéril provisto por el laboratorio de la siguiente manera: •
Descartar el primer chorro en el inodoro y sin que esta se suspenda se
recogen los 20 a 30 ml siguientes “chorro del medio” en el frasco estéril
(teniendo la precaución de destaparlo sólo en el momento de usar y taparlo rápidamente para evitar que se contamine). •
Descartar el último chorro en el inodoro.
RECIPIENTE: vidrio, boca ancha, estéril, limpio, sin detergentes o desinfectantes y con tapón de rosca.
TOMA DE MUESTRA: TÉCNICA PARA HOMBRES ADULTOS :
•
Lavado de las manos con agua y jabón.
•
Retraer completamente el prepucio, que se mantendrá así en todo momento, hasta que se haya recogido la orina.
•
Limpiar el glande con jabón neutro
•
Enjuagar con agua destilada
•
Orinar en el frasco estéril de la siguiente manera: •
Descartar el primer chorro en el inodoro.
•
Sin suspender la micción, colectar el “chorro medio” (20 –30 ml) en el frasco estéril
(teniendo la precaución de destaparlo sólo en el momento de usar y taparlo rápidamente para evitar que se contamine). •
Descartar el último chorro en el inodoro.
TÉCNICA PARA MUJERES ADULTAS:
•
La paciente debe quitarse la ropa interior.
•
Se lavará las manos cuidadosamente con agua y jabón, las enjuagará con agua y las secará con una toalla limpia.
•
Se separarán los labios mayores y menores, y los mantendrá separados en todo momento hasta que se haya recogido la orina.
•
Con una gasa enjabonada se lava bien la vulva pasándola de delante hacia atrás, se repetirá el proceso un total de 4 veces.
•
Enjuagar cuidadosamente con agua hervida para eliminar los restos de jabón.
•
Seguidamente enjuagar con abundante agua, sin secarse, orinar en el frasco estéril provisto por el laboratorio, de la siguiente manera: •
Descartar el primer chorro en el inodoro.
•
Colectar el “chorro medio” en el frasco estéril (teniendo la precaución de
destaparlo sólo en el momento de usar y taparlo rápidamente para evitar que se contamine). •
Descartar el último chorro en el inodoro.
TÉCNICA PARA NIÑOS: •
En niños y niñas mayores la orina se recoge de forma similar a los adultos.
•
En niños y niñas más pequeños, la orina se recogerá en colectores o bolsas estériles especialmente diseñadas para ellos de la siguiente forma:
•
Lavado cuidadoso de los genitales y área perineal igual que en los adultos.
•
Colocar la bolsa de plástico o el colector.
•
Vigilar la bolsa cada 30 minutos y tan pronto como el niño haya orinado, deben retirarse y enviarse al laboratorio para su procesamiento.
•
Si la micción no se ha realizado en una hora, se repite la operación colocando una nueva bolsa.
EN NIÑOS Y ADULTOS QUE NO CONTROLAN LOS ESFÍNTERES: Nunca utilizar bolsas colectoras para el estudio de urocultivo. Existen, otras alternativas como: a- Al acecho: el método se aplica con los lactantes. La dificultad estriba en que se desconoce cual será el momento en que se va a producir la micción. El operador deberá esperar entonces a que se produzca y recogerá en un frasco estéril lo que seguramente será la porción media del chorro miccional. b- Punción suprapúbica: procedimiento debe ser efectuado por médicos entrenados. En principio, se reserva para casos especiales, como neonatos graves, pacientes cuyos urocultivos previos presenten resultados conflictivos, sospecha de microorganismos de difícil desarrollo, etc. Primeramente se verifica que el paciente presente globo vesical palpable, se desinfecta zona pubiana con alcohol yodado y se deja actuar 1 min., se limpia con alcohol 70% y se punza con aguja adecuada en la zona ubicada 1 o 2 cm encima del pubis. Se aspira la orina y se vuelca en frasco estéril.
Punción con aspiración suprapúbica
•
Mejor recurso cuando el paciente se encuentra en estado de coma
•
Resultados con otras técnicas resultan confusos
Después de Colectar la muestra se realiza el análisis
correspondiente: CUANTITATIVO debido a la alta frecuencia con la que las
muestras se contaminan durante su obtención (excepto para las muestras de punciones suprapúbicas)
TRANSPORTE DE LA MUESTRA: •
Transporte al laboratorio lo antes posible
•
Cultivar las muestras dentro de las dos horas posteriores a la recolección; refrigerar y cultivar dentro de las siguientes 8 h cuando sea posible
•
Colocar un preservativo bacteriostático para orina/ tubo de transporte (3ml)no necesaria refrigeración
•
Las muestras de orina refrigeradas pueden ser conservadas 24 h o menos, las cuentas bacterianas a menudo permanecen estables durante 24 h a 4ºC
Requerir una nueva muestra cuando: •No
hay evidencias de que la muestra haya sido
refrigerada o tenga más de 2h en ser obtenida •Tiempo
y método de colecta no han sido
observados
•
En caso de que la muestra no pueda ser
remplazada y no haya sido colectada, transportada y manejada adecuadamente, se DOCUMENTA en el reporte final la calidad de la muestra como NO ADECUADA
VOLUMEN MINIMO DE LA MUESTRA. Es suficiente un volumen de orina de 5 – 10 ml
DETERMINACION
VOLUMEN (ML)
(COMENTARIOS
BACTERIAS
0,5 - 1
PRIMERA ORINA DE LA MAÑANA
HONGOS
>20
PRIMERA ORINA DE LA MAÑANA.
MYCOBACTERIAS
>20
PRIMERA ORINA DE LA MAÑANA TRES DÍAS CONSECUTIVOS.
ANAEROBIOS
1
ASPIRADO SUPRAPÚBICO, ENVIAR EN UN SISTEMA DE TRANSPORTE PARA ANAEROBIOS
VIRUS
10-15
PRIMERA ORINA DE LA MANANA, ENVIAR CON HIELO Y TRANSPORTAR AL LABORATORIO INMEDIATAMENTE
PARÁSITOS.
ORINA DE 24 HORAS
DETECCION DE BACTERIURIA ----------- Tinción de Gram Frotis: Colocar 10 μl de orina en un portaobjetos Fijar, teñir e identificar Determinar el N° de microorganismos por campo de inmersión Interpretación: La presencia de uno o más microorganismos por campo de inmersión correlaciona con una cuenta > 0 = 105 UFC/ml --- IVU La presencia de muchas células epiteliales escamosas indica contaminación ---repetir la muestra.
Tira reactiva
TIRAS REACTIVAS
Las tiras reactivas se utilizan para el análisis rápido de la orina, permiten detectar la presencia de eritrocitos, cristales, glucosa, cuerpos cetónicos o proteínas, así como pH. La presencia de leucocitos en orina es un indicador muy sensible de ITU. En pacientes sintomáticos, un sedimento urinario de 10 o más leucocitos por campo microscópico correlaciona, con bacteriuria significativa. Se debe realizar cultivo de orina y antibiograma ante cualquier paciente con sospecha de IVU.
Tira reactiva
Existe una diversidad de medios de cultivo utilizados en el urocultivo, entre los cuales se encuentran: Agar de MacConkey Medio diferencial para la detección, aislamiento y enumeración de bacterias coliformes y patógenos intestinales en aguas, productos lácteos y muestras biológicas.
Agar Eosina Azul de Metileno (Modificado) Medio ligeramente selectivo para el aislamiento y diferenciación de enterobacterias.
Agar Dextrosa de Sabouraud Medio para el cultivo de hongos filamentosos y levaduras.
Base de Caldo Tetrationato Base destinada a la preparación del medio selectivo de enriquecimiento para el aislamiento de Salmonella de las heces, orina, alimentos y otros materiales.
Base de Caldo Selenito Base destinada a la preparación del medio de enriquecimiento utilizado para el aislamiento de Salmonella y Shigella en heces, orina, agua y otros materiales contaminados.
OTROS MEDIOS RECOMENDADOS PARA UROCULTIVO
Agar Tergitol Agar CLED (para Gram positivos y Gram negativos) Agar Sangre Agar Biggy
E. coli
MacConkey
Pruebas Bioquímicas para identificar Enterobacterias
La reducción de nitrato a nitrito refleja la presencia de organismos gram-negativos, excepto en el caso de Pseudomonas aeruginosa.
Pruebas de degradación de aminoácidos: LIA (Lysine Iron Agar), MIO (Movilidad Indol Ornitina y Producción de H2S.
Citrato Simmons
Pruebas de fermentación de carbohidratos
Prueba de TSI (Triple azúcar hierro)
En la infección urinaria complicada la proteína C reactiva sérica se encuentra elevada y su determinación periódica puede ser de utilidad en la evaluación de la respuesta al tratamiento.
METODOS DE CULTIVO E INTERPRETACIÓN METODO DE DILUCIÓN o MEDIO MINIMO Procedimiento 1. Se homogeniza la orina agitando el frasco por rotación. 2. Adicionar 0.1 ml de orina a 9.9 ml de sol salina estéril -Mezclar 3. Transferir 0.1 ml de la mezcla a otro tubo con 9.9 ml de sol salina estéril 4. Transferir 1 ml de cada tubo y colocar en una caja petri vacia 5. Colocar Agar nutritivo encima de las bacterias 6. Mezclar con mov. circulares 7. Incubar (toda la noche) 8. Contar colonias y multiplicar por el factor de dilución
METODO DE ASA CALIBRADA Procedimiento 1. Con asa calibrada se toma una muestra de la orina (0.001 ml) y se
descarga en Línea recta en el centro de la placa de medio de cultivo 2. Se estría en forma cruzada a la primera descarga. 3. EL número de colonias deberá multiplicarse por 1,000 para conocer la cantidad de UFC que la muestra contiene por ml
- Método de Kass. Se inocula el medio depositando la cantidad de muestra tomada con el asa calibrada en el centro del agar y a partir de ahí se traza la línea recta de extremo a extremo de la caja. Con la misma asa, sin esterilizarla, se realiza una estriación en zig-zag de manera que intercepte la línea central de lado a lado.
- Técnica de cultivo de cuatro estrías. Se inocula con el asa calibrada, sin tomar más muestra cada vez y sin esterilizar entre una y otra línea.
Parámetros de interpretación. Existen diferentes normas de interpretación de cultivos de muestras de orina. El recuento bacteriano de la muestra es la parte más importante del urocultivo.
Criterios de Kass - Stanford Menos 1,000 UFC/ml o menos - se considera contaminación Entre 10,000 UFC/ml se considera sospecha de infección “hay que identificar con cultivos”/ otra muestra Mayor a 100,000 UFC/ml se considera infección de vías urinarias (IVU).
La detección de células epiteliales escamosas en la orina indica que la muestra es inadecuada para su procesamiento en el diagnóstico etiológico de una ITU.
Falsos negativos: - Paciente bajo tratamiento antimicrobiano - Agente etológico incapaz de crecer en medios o bajo las condiciones de incubación que se seleccionaron - Recipiente c restos de detergente o desinfectante - Paciente recibe liq intravenosos - el “asa calibrada” recoge menos vol del esperado - La muestra no se homogeneizó antes de introducir el asa - La alicuota descargada en la superficie del medio no se distribuyó adecuadamente.
Falsos positivos: - Paciente no efectuó la limpieza necesaria - Siembra del especimen después de 1 h a TA - El recipiente esta contaminado - el “asa calibrada” recoge más vol del esperado - La paciente suspendió la micción para recolectar la parte media - Cateter contaminado.
METODOLOGIA
1a. SESION
ESTRIADO EN SUPERFICIE DE AGAR (ASA CALIBRADA)
HOMOGENIZAR LA ORINA AGITANDO EL FRASCO POR ROTACIÓN
CON EL ASA CALIBRADA ESTÉRIL, TOMAR UNA ASADA Y DESCARGAR EN LÍNEA RECTA EN EL CENTRO DE LA PLACA DE AGAR EMB.
ESTRIAR MASIVAMENTE EN FORMA CRUZADA A LA 1a. DESCARGA.
REPETIR EL PROCEDIMIENTO EN LA PLACA DE AGAR SANGRE.
INCUBAR LAS CAJAS A 37ºC DURANTE 24 – 72 HRS.
METODOLOGIA
2a. SESION
CONTAR EL NUMERO DE COLONIAS DESARROLLADAS EN LAS CAJAS DE CULTIVO
TOMAR EN CUENTA LOS CRITERIOS DE KASS – STANFORD
Menos 10,000 UFC/ml se considera contaminación Entre 10,000 y 100,000 UFC/ml se considera sospecha de infección “hay que identifiar con cultivos” Mayor a 100,000 UFC/ml se considera infección de vías urinarias (IVU). *UFC Unidades Formadoras de Colonias
P-8 UROCULTIVO
NOV 06
M. EN C. YOLANDA GUEVARA G.
BACTERIURIA ASINTOMÁTICA: Se define como la presencia de bacterias en orina en ausencia de síntomas. Su significado clínico se reduce a los niños con reflujo vesículouretral y a las mujeres embarazadas, en cualquier etapa de la gestación y a pacientes próximos a cirugías del tracto urinario.
CISTITIS Es el término aplicado a la UTI confinado solamente a la vejiga. Sus síntomas comprenden disuria, aumento de frecuencia, urgencia y dolor . Esta patología es la más frecuente y la de mayor incidencia en mujeres de toda edad.
PIELONEFRITIS Y UTI FEBRIL Son diagnósticos clínicos que comprometen infecciones más invasivas del tracto urinario.Se asume inflamación del riñón y de la pelvis renal, se acompañan de sintomatología como: dolor al costado del abdomen, respuesta inflamatoria sistémica con fiebre, malestar, cefalea, nauseas. Pacientes con alteraciones de sus mecanismos de defensa o malformaciones del tracto urinario tienen un riesgo mayor , desarrollando serias secuelas y no responden al tratamiento.
La infección de vías urinarias (IVU) es una de las infecciones bacterianas más frecuentes en mujeres (recto mas cerca de la uretra y más corta) y su espectro va desde una bacteriuria asintomática a una pielonefritis aguda (PNA).
El Urocultivo debe realizarse cuando hay signos de infección urinaria. Insuficiencia renal.
Agentes etiológicos causantes de IVU: Escherichia coli, Enterococcus, Klebsiella, Enterobacter, Proteus sp., Pseudomonas, Serratia, Citrobacter y Streptococcus pyogenes.
Las infecciones del tracto urinario pueden ser producidas por agentes etiológicos especifico y raras veces por una flora mixta. Es muy importante entonces llevar a cabo estudios cuantitativos de bacterias viables en la orina.
Las infecciones de vías urinarias se desarrollan como consecuencia de infecciones exógena ó por vía ascendente que por endógenas o provenientes de otras partes del organismo, tales como septicemias o bacteriemias.
Escherichia coli causa el 80% de las IVU
FACTORES PREDISPONENTES DE IVU:
• Falta de higiene •Vaciamiento incompleto de vejiga durante micción •Cateterismo uretral prolongado • Diabetes • Hipertensión arterial • Inmunosupresión • Uropatía obstructiva • Alteraciones neurogénicas de la vejiga
Infección en riñón o migrar a sangre
Compromiso de la vida del paciente
Microorganismos Patógenos
Escherichia coli
Uropatógena (UPEC)
Klebsiella pneumoniae Proteus Staphylococcus Serratia maurcescens Pseudomonas aureuginosa Enterococcus faecalis
80-90%
5-10 %
5-10 %
TOMA DE MUESTRA: La orina normalmente es un líquido estéril, porlo cual es importante colectarla adecuadamente, ésta puede contaminarse con microorganismos de la flora normal del periné, la próstata, la uretra o la vagina.
TIPOS DE COLECTA: • • • • • •
CHORRO MEDIO DE ORINA EMITIDA EXPONTANEAMENTE CHORRO MEDIO DE ORINA CATÉTER VESICAL (no de rutina) POR PUNCIÓN (ASPIRACIÓN) SUPRAPÚBICA DE LA VEJIGA (infantes) POR CITOSCOPIA POR SONDAS FLOLEY (no recomendados para cultivos)
TOMA DE MUESTRA:
•
Obtener las muestras en la mañana (1er orina del día)
•
No forzar la ingesta de líquidos
•
Tres muestras para pacientes asintomáticos.
•
Limpieza de las zonas cercanas a la uretra
•
Orinar en el frasco estéril provisto por el laboratorio de la siguiente manera: •
Descartar el primer chorro en el inodoro y sin que esta se suspenda se
recogen los 20 a 30 ml siguientes “chorro del medio” en el frasco estéril
(teniendo la precaución de destaparlo sólo en el momento de usar y taparlo rápidamente para evitar que se contamine). •
Descartar el último chorro en el inodoro.
RECIPIENTE: vidrio, boca ancha, estéril, limpio, sin detergentes o desinfectantes y con tapón de rosca.
TOMA DE MUESTRA: TÉCNICA PARA HOMBRES ADULTOS :
•
Lavado de las manos con agua y jabón.
•
Retraer completamente el prepucio, que se mantendrá así en todo momento, hasta que se haya recogido la orina.
•
Limpiar el glande con jabón neutro
•
Enjuagar con agua destilada
•
Orinar en el frasco estéril de la siguiente manera: •
Descartar el primer chorro en el inodoro.
•
Sin suspender la micción, colectar el “chorro medio” (20 –30 ml) en el frasco estéril
(teniendo la precaución de destaparlo sólo en el momento de usar y taparlo rápidamente para evitar que se contamine). •
Descartar el último chorro en el inodoro.
TÉCNICA PARA MUJERES ADULTAS:
•
La paciente debe quitarse la ropa interior.
•
Se lavará las manos cuidadosamente con agua y jabón, las enjuagará con agua y las secará con una toalla limpia.
•
Se separarán los labios mayores y menores, y los mantendrá separados en todo momento hasta que se haya recogido la orina.
•
Con una gasa enjabonada se lava bien la vulva pasándola de delante hacia atrás, se repetirá el proceso un total de 4 veces.
•
Enjuagar cuidadosamente con agua hervida para eliminar los restos de jabón.
•
Seguidamente enjuagar con abundante agua, sin secarse, orinar en el frasco estéril provisto por el laboratorio, de la siguiente manera: •
Descartar el primer chorro en el inodoro.
•
Colectar el “chorro medio” en el frasco estéril (teniendo la precaución de
destaparlo sólo en el momento de usar y taparlo rápidamente para evitar que se contamine). •
Descartar el último chorro en el inodoro.
TÉCNICA PARA NIÑOS: •
En niños y niñas mayores la orina se recoge de forma similar a los adultos.
•
En niños y niñas más pequeños, la orina se recogerá en colectores o bolsas estériles especialmente diseñadas para ellos de la siguiente forma:
•
Lavado cuidadoso de los genitales y área perineal igual que en los adultos.
•
Colocar la bolsa de plástico o el colector.
•
Vigilar la bolsa cada 30 minutos y tan pronto como el niño haya orinado, deben retirarse y enviarse al laboratorio para su procesamiento.
•
Si la micción no se ha realizado en una hora, se repite la operación colocando una nueva bolsa.
EN NIÑOS Y ADULTOS QUE NO CONTROLAN LOS ESFÍNTERES: Nunca utilizar bolsas colectoras para el estudio de urocultivo. Existen, otras alternativas como: a- Al acecho: el método se aplica con los lactantes. La dificultad estriba en que se desconoce cual será el momento en que se va a producir la micción. El operador deberá esperar entonces a que se produzca y recogerá en un frasco estéril lo que seguramente será la porción media del chorro miccional. b- Punción suprapúbica: procedimiento debe ser efectuado por médicos entrenados. En principio, se reserva para casos especiales, como neonatos graves, pacientes cuyos urocultivos previos presenten resultados conflictivos, sospecha de microorganismos de difícil desarrollo, etc. Primeramente se verifica que el paciente presente globo vesical palpable, se desinfecta zona pubiana con alcohol yodado y se deja actuar 1 min., se limpia con alcohol 70% y se punza con aguja adecuada en la zona ubicada 1 o 2 cm encima del pubis. Se aspira la orina y se vuelca en frasco estéril.
Punción con aspiración suprapúbica
•
Mejor recurso cuando el paciente se encuentra en estado de coma
•
Resultados con otras técnicas resultan confusos
Después de Colectar la muestra se realiza el análisis
correspondiente: CUANTITATIVO debido a la alta frecuencia con la que las
muestras se contaminan durante su obtención (excepto para las muestras de punciones suprapúbicas)
TRANSPORTE DE LA MUESTRA: •
Transporte al laboratorio lo antes posible
•
Cultivar las muestras dentro de las dos horas posteriores a la recolección; refrigerar y cultivar dentro de las siguientes 8 h cuando sea posible
•
Colocar un preservativo bacteriostático para orina/ tubo de transporte (3ml)no necesaria refrigeración
•
Las muestras de orina refrigeradas pueden ser conservadas 24 h o menos, las cuentas bacterianas a menudo permanecen estables durante 24 h a 4ºC
Requerir una nueva muestra cuando: •No
hay evidencias de que la muestra haya sido
refrigerada o tenga más de 2h en ser obtenida •Tiempo
y método de colecta no han sido
observados
•
En caso de que la muestra no pueda ser
remplazada y no haya sido colectada, transportada y manejada adecuadamente, se DOCUMENTA en el reporte final la calidad de la muestra como NO ADECUADA
VOLUMEN MINIMO DE LA MUESTRA. Es suficiente un volumen de orina de 5 – 10 ml
DETERMINACION
VOLUMEN (ML)
(COMENTARIOS
BACTERIAS
0,5 - 1
PRIMERA ORINA DE LA MAÑANA
HONGOS
>20
PRIMERA ORINA DE LA MAÑANA.
MYCOBACTERIAS
>20
PRIMERA ORINA DE LA MAÑANA TRES DÍAS CONSECUTIVOS.
ANAEROBIOS
1
ASPIRADO SUPRAPÚBICO, ENVIAR EN UN SISTEMA DE TRANSPORTE PARA ANAEROBIOS
VIRUS
10-15
PRIMERA ORINA DE LA MANANA, ENVIAR CON HIELO Y TRANSPORTAR AL LABORATORIO INMEDIATAMENTE
PARÁSITOS.
ORINA DE 24 HORAS
DETECCION DE BACTERIURIA ----------- Tinción de Gram Frotis: Colocar 10 μl de orina en un portaobjetos Fijar, teñir e identificar Determinar el N° de microorganismos por campo de inmersión Interpretación: La presencia de uno o más microorganismos por campo de inmersión correlaciona con una cuenta > 0 = 105 UFC/ml --- IVU La presencia de muchas células epiteliales escamosas indica contaminación ---repetir la muestra.
Tira reactiva
TIRAS REACTIVAS
Las tiras reactivas se utilizan para el análisis rápido de la orina, permiten detectar la presencia de eritrocitos, cristales, glucosa, cuerpos cetónicos o proteínas, así como pH. La presencia de leucocitos en orina es un indicador muy sensible de ITU. En pacientes sintomáticos, un sedimento urinario de 10 o más leucocitos por campo microscópico correlaciona, con bacteriuria significativa. Se debe realizar cultivo de orina y antibiograma ante cualquier paciente con sospecha de IVU.
Tira reactiva
Existe una diversidad de medios de cultivo utilizados en el urocultivo, entre los cuales se encuentran: Agar de MacConkey Medio diferencial para la detección, aislamiento y enumeración de bacterias coliformes y patógenos intestinales en aguas, productos lácteos y muestras biológicas.
Agar Eosina Azul de Metileno (Modificado) Medio ligeramente selectivo para el aislamiento y diferenciación de enterobacterias.
Agar Dextrosa de Sabouraud Medio para el cultivo de hongos filamentosos y levaduras.
Base de Caldo Tetrationato Base destinada a la preparación del medio selectivo de enriquecimiento para el aislamiento de Salmonella de las heces, orina, alimentos y otros materiales.
Base de Caldo Selenito Base destinada a la preparación del medio de enriquecimiento utilizado para el aislamiento de Salmonella y Shigella en heces, orina, agua y otros materiales contaminados.
OTROS MEDIOS RECOMENDADOS PARA UROCULTIVO
Agar Tergitol Agar CLED (para Gram positivos y Gram negativos) Agar Sangre Agar Biggy
E. coli
MacConkey
Pruebas Bioquímicas para identificar Enterobacterias
La reducción de nitrato a nitrito refleja la presencia de organismos gram-negativos, excepto en el caso de Pseudomonas aeruginosa.
Pruebas de degradación de aminoácidos: LIA (Lysine Iron Agar), MIO (Movilidad Indol Ornitina y Producción de H2S.
Citrato Simmons
Pruebas de fermentación de carbohidratos
Prueba de TSI (Triple azúcar hierro)
En la infección urinaria complicada la proteína C reactiva sérica se encuentra elevada y su determinación periódica puede ser de utilidad en la evaluación de la respuesta al tratamiento.
METODOS DE CULTIVO E INTERPRETACIÓN METODO DE DILUCIÓN o MEDIO MINIMO Procedimiento 1. Se homogeniza la orina agitando el frasco por rotación. 2. Adicionar 0.1 ml de orina a 9.9 ml de sol salina estéril -Mezclar 3. Transferir 0.1 ml de la mezcla a otro tubo con 9.9 ml de sol salina estéril 4. Transferir 1 ml de cada tubo y colocar en una caja petri vacia 5. Colocar Agar nutritivo encima de las bacterias 6. Mezclar con mov. circulares 7. Incubar (toda la noche) 8. Contar colonias y multiplicar por el factor de dilución
METODO DE ASA CALIBRADA Procedimiento 1. Con asa calibrada se toma una muestra de la orina (0.001 ml) y se
descarga en Línea recta en el centro de la placa de medio de cultivo 2. Se estría en forma cruzada a la primera descarga. 3. EL número de colonias deberá multiplicarse por 1,000 para conocer la cantidad de UFC que la muestra contiene por ml
- Método de Kass. Se inocula el medio depositando la cantidad de muestra tomada con el asa calibrada en el centro del agar y a partir de ahí se traza la línea recta de extremo a extremo de la caja. Con la misma asa, sin esterilizarla, se realiza una estriación en zig-zag de manera que intercepte la línea central de lado a lado.
- Técnica de cultivo de cuatro estrías. Se inocula con el asa calibrada, sin tomar más muestra cada vez y sin esterilizar entre una y otra línea.
Parámetros de interpretación. Existen diferentes normas de interpretación de cultivos de muestras de orina. El recuento bacteriano de la muestra es la parte más importante del urocultivo.
Criterios de Kass - Stanford Menos 1,000 UFC/ml o menos - se considera contaminación Entre 10,000 UFC/ml se considera sospecha de infección “hay que identificar con cultivos”/ otra muestra Mayor a 100,000 UFC/ml se considera infección de vías urinarias (IVU).
La detección de células epiteliales escamosas en la orina indica que la muestra es inadecuada para su procesamiento en el diagnóstico etiológico de una ITU.
Falsos negativos: - Paciente bajo tratamiento antimicrobiano - Agente etológico incapaz de crecer en medios o bajo las condiciones de incubación que se seleccionaron - Recipiente c restos de detergente o desinfectante - Paciente recibe liq intravenosos - el “asa calibrada” recoge menos vol del esperado - La muestra no se homogeneizó antes de introducir el asa - La alicuota descargada en la superficie del medio no se distribuyó adecuadamente.
Falsos positivos: - Paciente no efectuó la limpieza necesaria - Siembra del especimen después de 1 h a TA - El recipiente esta contaminado - el “asa calibrada” recoge más vol del esperado - La paciente suspendió la micción para recolectar la parte media - Cateter contaminado.
METODOLOGIA
1a. SESION
ESTRIADO EN SUPERFICIE DE AGAR (ASA CALIBRADA)
HOMOGENIZAR LA ORINA AGITANDO EL FRASCO POR ROTACIÓN
CON EL ASA CALIBRADA ESTÉRIL, TOMAR UNA ASADA Y DESCARGAR EN LÍNEA RECTA EN EL CENTRO DE LA PLACA DE AGAR EMB.
ESTRIAR MASIVAMENTE EN FORMA CRUZADA A LA 1a. DESCARGA.
REPETIR EL PROCEDIMIENTO EN LA PLACA DE AGAR SANGRE.
INCUBAR LAS CAJAS A 37ºC DURANTE 24 – 72 HRS.
METODOLOGIA
2a. SESION
CONTAR EL NUMERO DE COLONIAS DESARROLLADAS EN LAS CAJAS DE CULTIVO
TOMAR EN CUENTA LOS CRITERIOS DE KASS – STANFORD
Menos 10,000 UFC/ml se considera contaminación Entre 10,000 y 100,000 UFC/ml se considera sospecha de infección “hay que identifiar con cultivos” Mayor a 100,000 UFC/ml se considera infección de vías urinarias (IVU). *UFC Unidades Formadoras de Colonias
P-8 UROCULTIVO
NOV 06
M. EN C. YOLANDA GUEVARA G.
BACTERIURIA ASINTOMÁTICA: Se define como la presencia de bacterias en orina en ausencia de síntomas. Su significado clínico se reduce a los niños con reflujo vesículouretral y a las mujeres embarazadas, en cualquier etapa de la gestación y a pacientes próximos a cirugías del tracto urinario.
CISTITIS Es el término aplicado a la UTI confinado solamente a la vejiga. Sus síntomas comprenden disuria, aumento de frecuencia, urgencia y dolor . Esta patología es la más frecuente y la de mayor incidencia en mujeres de toda edad.
PIELONEFRITIS Y UTI FEBRIL Son diagnósticos clínicos que comprometen infecciones más invasivas del tracto urinario.Se asume inflamación del riñón y de la pelvis renal, se acompañan de sintomatología como: dolor al costado del abdomen, respuesta inflamatoria sistémica con fiebre, malestar, cefalea, nauseas. Pacientes con alteraciones de sus mecanismos de defensa o malformaciones del tracto urinario tienen un riesgo mayor , desarrollando serias secuelas y no responden al tratamiento.
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