Tempo 3v6n1f

FLUJO DE TRABAJO…

Dilución 1/10

Lectura e interpretación automática 4

11

2 Llenado

33 Incubación

Dilución mínima requerida

Solución madre (1/10 ) Diluyente primario Agua Peptonada

Aguar Estéril

Diluyente secundario

Volumen final en el vial

Dilución final Rango

1 mL

(1/10 )

0.1 mL

(1/10 )

+

+

3 mL

3.9 mL

= 4 mL

= 4 mL

1/40

1/400

<10 a 49.000 UFC

<100 a 490.000 UFC

Otras Diluciones •

Dilución 1/4.000

Dilución 1/40 muestras ambientales

1ml

9ml Dil. 10-1

Hisopo Esponja

Dil. 10-20.1 ml

10ml 100ml

3.9 ml Agua destilada esteril

1ml 3 ml Agua destilada esteril

Dilución

Dilució n

¼.000

1/4

Rango <1000 a 4.900.000 ufc

Rango <10 a 49.000 ufc

3 PRINCIPIOS ACTIVIDAD ENZIMATICA Aparición de fluorescencia Negati vo

Positiv o

OXIDO REDUCCION Aparición de fluorescencia Positiv o

Negati vo

ACIDIFICACION Desaparición de Fluorescencia

Negati vo pH ≥ 7

Positiv o pH ≤ 6

INTERFERENCIAS TEMPO MUESTRAS ALTAMENTE COLOREADAS Ó TURBIAS para TEMPO STA, TC, CC y EB : • • •

Concentrados de frutas de color fuerte (ejm. Mora) Cocoa, chocolate, coca-cola Especies (ejm. Pimienta)

INTERFERENCIAS TEMPO MUESTRAS QUE TENGAN ENZIMAS para TEMPO TVC y EC: • • • •

Viceras crudas, Moluscos crudos Avellanas, Almendras y nueces Productos ricos en Harinas ó Almidón, Mezclas de tortas listas para usar Sopas ó salsas deshidratadas.

INTERFERENCIAS TEMPO Muestras de Alimentos que presenten oxidación para TEMPO STA, CC, TC y EB : • •

Champiñones Crudos ó frescos Banano, manzanas, berenjena, alcachofa, aguacate, etc.

La señal fluorescente se puede afectar durante el tiempo de incubación, debido a una reacción de oxidación. Solución: Si el límite mínimo lo permite diluir más.

Muestras de Alimentos que contengan inhibidores naturales TEMPO TVC : Algunos Té, café, ajó, cebolla, orégano, especies, pimienta, productos altos en sal, hierbas aromáticas.

Muestras de Alimentos con pH ácido TEMPO STA, CC, TC y EB : Jugo de Frutas, Aderezos de Ensaladas El medio de cultivo contiene un indicador de pH fluorescente. Los microorganismos objetivo presentes en la tarjeta asimilan los nutrientes durante la incubación, dando como resultado una disminución en el pH y la desaparición de la fluorescencia. De este modo condiciones

INTERFERENCIAS TEMPO Productos en POLVO TEMPO STA : Productos deshidratados (por ej. leche en polvo, sopas deshidratadas, mezclas de tortas, cereales, etc.) analizados con una dilución TEMPO de 1/40.Los productos deshidratados diluidos a 1/40 disponen de un nivel alto de sólidos residuales y por consiguiente requieren un protocolo específicamente adaptado. Solución: Realizar el montaje en la dilución 1/400.

TIEMPOS CON TEMPO Pesaje Agua Esteril muestra

Iniciar incubación Llenado Escanear Tarjeta

Inicia r Lectu ra

…. 45 min. 15 min TC/ST (ISO 7218) no más de 2 horas A EB/CC/EC

24 h

26 h

27 h

22 h

26 h

27 h

TVC/LAB

40 h

46 h

48 h

YM

72h

75 h

76 h

Parametro

Refrigeración Reminder

Dilución y rango de enumeración

Tiempo de incubación

Temperatura incubación

d=1/400 102 to 4,9 105

40-48 h

30°C ISO 35°C BAM (32°C Lacteos)

Después incubation

22-28 h / 24-28h ó 40-48h

d=1/40 10 to 4,9 104

22-27 h

35°C ISO

Antes incubation

d=1/40 10 to 4,9 104

24-27 h

30°C ISO

Antes incubation

d=1/40 10 to 4,9 104

22-27 h

35°C BAM (32°C lacteos)

Antes incubation

d=1/40 10 to 4,9 104

22-27 h

37°C ISO 35°C BAM

Después incubation

d=1/400 102 to 4,9 105

40-48 h

30°C ISO 35°C Comp.

Después incubation

d=1/40 10 to 4,9 104

24-27 h

37°C ISO 35°C BAM

Después incubation

d=1/40 10 to 4,9 104

72-76 h

25°C

No se recomienda Realizar Verificación

TEMPO TVC Recuento de flora mesofílica aeróbica total en 40-48 horas TEMPO TC Recuento de coliformes totales según la definición de la ISO 4832 en 24 horas TEMPO EC Recuento de Escherichia coli en 24 horas TEMPO STA Recuento de estafilococos coagulasa positivos (Staphylococcus aureus) en 24 horas TEMPO LAB Recuento de bacterias ácidolácticas en 40-48 horas TEMPO YM Recuento de levaduras y mohos en 72-76 horas TEMPO EB Recuento de Enterobacteriaceae en 24 horas .

ESTACIÓN DE PREPARACIÓN

ESTACIÓN DE LECTURA