Tarea 4 – Microscopio
Estudiante número 1: Luz Ángela Flórez Pineda Código: 1.092.351.719 Estudiante número 2: Héctor Julián Flórez Código: 1.053.773.376
Tutor: OMAR IVÁN VARGAS
Universidad Abierta y a Distancia Fecha 13 de abril de 2018
Introducción La biología celular se constituyó en un poderoso marco teórico que permitió dilucidar los procesos y mecanismos característicos de los seres vivos, a medida del siglo XIX, las técnicas microscópicas y los ensayos bioquímicos revelaron un mundo insospechado de organelas y estructuras complejas e interrelacionadas. 1 Las células y sus estructuras son demasiado pequeñas para observarlas a simple vista, por ello el uso adecuado de herramientas como el microscopio ha permitido al hombre observar, analizarla, estudiarla permitiendo así ver la reproducción, el comportamiento, su interacción con el medio, el l. En el siguiente trabajó se encontrará el resultado de las practicas hechas en la ciudad de Bucaramanga, con el respectivo desarrollo de cuestionarios, fotografías y análisis, a fin de abarcar los conocimientos vistos desde el inicio del curso.
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Curtis Biología Séptima edición tomado de la página 33 http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2055/VisorEbookV2/Ebook/9789500605502#{%22Pagina%22:%2233%22,%22 Vista%22:%22Indice%22,%22Busqueda%22:%22%22}
Objetivos 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.
Conocer las normas de bioseguridad en el laboratorio Identificar las partes del microscopio y su funcionamiento. Comprobar las propiedades o capacidades que posee el microscopio. Simular el manejo del microscopio óptico Calcular el diámetro del campo de visión Simular la preparación de montajes húmedos y observación de muestras. Comprobar los principios en que se basa la microscopía óptica. Desarrollar en trabajo colaborativo el informe de laboratorio
INFORME Constará de los siguientes aspectos: 1. Observar en el Menú Normas: el video Normas generales de seguridad en el laboratorio y responder al siguiente cuestionario: 1.1.¿Qué es bioseguridad? Según la OMS (2005) es un conjunto de normas y medidas preventivas para proteger la salud del personal, frente a riesgos biológicos, químicos y físicos a los que está expuesto en el desempeño de sus funciones, también a los pacientes y al medio ambiente 1.2.¿Cuáles serían para usted las normas básicas de bioseguridad en el laboratorio de biología? 2. Utilizar la "bata de Laboratorio" debidamente abotonada y limpia y retirarla antes de salir del laboratorio. 3. Usar guantes para manipular muestras y cultivos de microorganismos, evitar contaminar el área de trabajo y los implementos personales (esfero, libros, apuntes); descartarlos cuidadosamente en la caneca roja. 4. Dar uso adecuado a los guantes, ya que son un “arma de doble filo” 5. Utilizar mascarillas de respiración, la cual debe encajar cómoda y adecuadamente sobre el puente de la nariz para evitar el empañamiento de las gafas protectoras. Esta protege sobre todo la mucosa nasal que es más susceptible a infecciones que la bucal, debido a que esta última tiene mayor cantidad de flora normal que la protege contra infecciones. 6. Utilizar anteojos de protección para evitar lesiones oculares causadas por partículas proyectadas hacia el rostro del operador, a la vez que protege contra infecciones considerando que muchos gérmenes de la flora oral normal son patógenos oportunistas. 7. No entrar al Laboratorio implementos que no tengan que ver con la práctica. 8. No comer, beber, fumar ni colocar otros objetos en la boca, mientras esté en el Laboratorio. 9. Jamás llevarse el lapicero, bolígrafo o cualquier otro implemento a la boca. 10. No almacenar alimentos en la nevera ni en los estantes del Laboratorio. 11. Hablar lo mínimo mientras está trabajando en el Laboratorio. 12. No pipetear con la boca. 13. No usar jeringas o agujas para manipular líquidos o especímenes clínicos. 14. Utilizar únicamente mecheros comerciales, NUNCA improvisados. 15. Mantener el Laboratorio limpio y aseado. 16. Descontaminar las áreas de trabajo antes de iniciar la práctica de laboratorio, cada vez que se derrame una sustancia y, una vez terminada la práctica.
17. Descartar todo el material contaminado en los recipientes destinados para ello. 18. Lavarse las manos luego de manipular cultivos, muestras, animales y, antes de abandonar el Laboratorio. 19. Conocer las reglas del uso y cuidado de todos los equipos. 20. Leer y entender los pasos de cada procedimiento antes de proceder a realizarlo. 21. Preguntar al docente cualquier duda sobre los procedimientos a seguir. 22. No permitir el ingreso de personas ajenas a las áreas de trabajo. 23. Notificar de inmediato al docente cualquier accidente 1.3. ¿Cómo puede usted evitar en el laboratorio daños a su salud? Es indispensable al momento de acudir al laboratorio tener un pre saber mínimo para que al momento de utilizar o manipular alguna sustancia, o material orgánico se tengan los cuidados necesarios respecto a ello, importante atacar las recomendaciones y ordenes de la persona acargo del laboratorio Uso adecuado de la bata, tapabocas, guantes Lavado de manos Llevar los deshechos a su respectiva Caneca mantener la mesa libres de materiales extraños a los requeridos al trabajo En caso un derramamiento de algún producto toxico debe alertar a los demás para hacer una limpieza lo más tapido posible No consumir alimentos 1.4.Conclusiones Es indispensable al momento de acudir al laboratorio tener un pre saber mínimo para que al momento de utilizar o manipular alguna sustancia, o material orgánico se tengan los cuidados necesarios respecto a ello, importante atacar las recomendaciones y ordenes de la persona acargo del laboratorio 2. Observar en el menú fundamentación las animaciones correspondientes a principios ópticos y responder al siguiente cuestionario: 2.1. ¿Cuándo una imagen es aumentada, real e invertida? Si un objeto se ubica a una distancia mayor del foco se obtiene una imagen real invertida, a medida que se aleja el objeto del foco la imagen se percibe más pequeña 2.2. ¿Cuándo una imagen es aumentada, virtual y derecha? Esta imagen se debe formar a una distancia del ocular, menor que la distancia focal del mismo. En estas condiciones, la nueva imagen que se forma es virtual y derecha. Con relación al objeto.
2.3. ¿En qué consiste la refracción de la luz? La distancia focal de una lente depende del índice de refracción del material del cual está hecha y del medio en que envuelve la lente, cuando los rayos de luz se mueven en un medio homogéneo como el aire, se propagan en línea recta, pero cuando cae sobre la superficie de un medio de diferente densidad a del medio del cual se venía propagando cambia de dirección y de velicidad a estos cambios se le conoce como la refracción de la luz, 2.4.¿Qué origina el fenómeno de refracción en la observación microscópica? En microscopia se encuentran diferentes medios, aire, agua, aceite de inmersión y vidrio cuyos índices de infracción son 1.0 1.33 1.51 1.54 respectivamente, al observar una muestra a través del microscopio los rayos de luz tienen que atravesar estos medios y son refractados cambiando de dirección 2.5. ¿Qué función cumple el aceite de inmersión? Este Utilizado como medio de inclusión en microscopía. Se utiliza colocando una gota en el objetivo para facilitar la visión del microscopio al entrar en o con el cubre-objetos. Su falta o secado puede producir una mala visión en el microscopio. Para usos de laboratorio, análisis, investigación y química fina Un objetivo de inmersión en aceite está diseñado para ser usado con aceite entre el lente frontal y el cubre objetos de vidrio, y su función es la de eliminar casi completamente la desviación de los rayos de luz y así aumenta considerablemente la eficacia del objetivo del micros copio 3. Realizar en el menú componentes la ejercitación: Partes del microscopio 3.1. Realice la ejercitación: “Partes del microscopio”, Una vez realizada la ejercitación en la siguiente representación gráfica de un microscopio, reconozca y ubique cada una de las siguientes partes
3.2. Con base en el paso previo, clasifique las partes mecánicas y ópticas del microscopio en el siguiente cuadro Partes mecánicas Partes ópticas Partes mecánicas Brazo Pinzas Interruptor Base Platina Tornillo micrométrico Tornillo Macrométrico Tubo Revolver
Partes ópticas Oculares Objetivos Diafragma Fuente de luz Condensador
3.3.Cuáles son los valores de cada uno de los objetivos 4x, 10x, 40x, 100x 4.
Observar en el Menú Demostración los videos microscopio primera parte y microscopio segunda parte y responder al siguiente cuestionario:
4.1. ¿Cuál es el objetivo de esta práctica? Conocer a profundidad el manejo del microscopio usando los objetivos de acuerdo al objeto a analizar 4.2. ¿Qué materiales necesita? ¿Los conoce todos? ¿Cuáles desconoce? Aceite de inmersión Agua Lamina coloreada 4.3. ¿Qué temas del módulo puede relacionar con esta experiencia? Justifique su respuesta. Mitosis y meiosis Función de la membrana plasmática
Hemolisis, creación y plasmólisis y turgencia
Temas vistos en la práctica, donde para observar que sucedía y cuál era el comportamiento respecto al tema se debía conocer el manejo del microscopio para enfocar
4.4.¿Qué habilidades cree que se pueden desarrollar al realizar ésta práctica de laboratorio? Manejo adecuado del microscopio, para analizar muestras pequeñas 4.5.¿Qué utilidad o aplicaciones prácticas puede derivar del conocimiento que se desarrolla con estos laboratorios? El conocimiento del comportamiento de las células, Análisis de resultados de muestras, comportamiento de bacterias 4.6. Después de observar el video ¿Cuál es la conclusión a la que llega? Todos los seres vivos estamos hechos de partículas pequeñas, nuestras células, para conocer su comportamiento se deben utilizar herramientas que permitan llegar a ellas, y poder analizarlas a profundidad, pero no solo las células sino las bacterias, en el video se podrá visualizar un ácaro el cual a simple vista no se puede ver. 5. Realice en el menú Ejercitación/las simulaciones 5.1 Realice en el menú Ejercitación/las simulación Partes del microscopio Una vez realizada la ejercitación pegue en el informe el pantallazo con la imagen y sus respuestas.
5.2.Realice en el menú Ejercitación/la simulación Manejo Registre las observaciones realizadas en el siguiente cuadro OBJETO OBSERVADO
AUMENTO UTILIZADO
4X
DIBUJO/PANTALLAZO
ANÁLISIS Y CONCLUSIONES
Se observa al lado izquierdo un protozoo y al lado derecho una larva
Agua estancada
10X
A las 9 en punto se puede observar un protozoo y en el centro la larva en el lado a las 3 en punto otros protozoarios
40X Se puede ver de mayor tamaño el protozoo con sus movimientos
5.2.1. ¿Qué organismos pueden observarse en la gota de agua estancada? Larva Protozoarios 5.2.2. ¿Son todos de igual tamaño y forma? Apenas se cambia de objetivo cambia la forma de verse, y su tamaño 5.2.3. ¿Se observan organismos móviles o estáticos? Móviles. 5.3.1. Defina los tipos de montaje que se pueden hacer en el laboratorio. Muestra húmeda Muestra fijada 5.3.2. Describa los pasos para la elaboración de un montaje húmedo.
Alistar los materiales que se vayan a utilizar (Microscopio, Laminilla, gotero, papel absorbente, muestra, portaobjetos) Poner la muestra /agua estancada sobre el portaobjetos Poner la laminilla sobre el portaobjetos Encender el microscopio Poner el objetivo de menor aumento Bajar la platina completamente girando el tornillo macrométrico Poner la lámina sobre la platina sujetándola con las pinzas ubicar bien la muestra de manera que puede centrada girando el tornillo iniciar la observación con el objetivo de menor observación 4X y girar con el tornillo macrométrico al contrario de las manecillas del reloj para subir la platina hasta el tope Cerrar o abrir diafragma de manera que se organice la luz 5.3.3. ¿Qué debe hacerse para lograr una iluminación adecuada? Cerrar o abrir diafragma hasta una posición intermedia accionando su perilla en sentido contraria a las agujas del reloj para que la luz no sea ni muy brillante ni muy tenue 5.3.4. ¿Cómo se enfoca el microscopio al iniciar la observación? Girando a través del ocular girar el tornillo macrométrico hasta observar la imagen, Cuando se observe algo nítida la muestra girar el tornillo micrométrico hasta obtener una imagen más nítida 5.3.5. ¿Con el objetivo de mayor aumento se necesita menor o mayor iluminación de la que se necesita con el de menor aumento? La iluminación sería la misma 5.3.6. ¿Qué función cumple el aceite de inmersión? Cumple con la función de aumentar la resolución del microscopio mediante la inmersión del objetivo (100X) ¿Con qué objetivo se utiliza? 100X 5.3.7. ¿Cuál es el poder de aumento cuando se estén utilizando cada uno de los objetivos de 4X, 10X, 40X y el ocular de 100X? Permite magnificar la imagen 4x: veces su tamaño 10x: 10 veces su tamaño 40X x: 40 veces su tamaño 100x: 100 veces su tamaño 5.4. Realice en el menú Ejercitación/la simulación poderes
5.4.1. Para las muestras de la letra, la hebra de hilo y la tela de cuadros observadas determine: ¿Cómo se manifiesta el poder de resolución? Con el objetivo de 40x en el caso del hilo se pueden ver dos hebras de color rojo y azul, con la letra se pueden ver los espacios marcados que forman la letra e y espacios blancos Distancia mínima entre dos puntos próximos que pueden versen separados, el ojo humano no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una décima de milímetro con el microscopio óptico el poder separador máximo es de 0,2 décimas de micra, mejora la visón unas 500 veces con relación a la del ojo humano
¿Cómo se manifiesta el poder de aumento? permite magnificar la imagen, se multiplica el aumento del ocular por el aumento del objetivo para un igual de aumento total ¿Cómo se manifiesta el poder de definición? Es la capacidad del objetivo de formar imágenes en contornos nítidos ¿Cómo se manifiesta el poder de penetración o profundidad? Permite la observación simultanea de varios planos de la preparación de manera simultanea ¿Cómo se manifiesta el poder de definición en las células de cebolla? 10x: Poder de penetración 40X x: Poder de resolución 100x: Inmersión
5.4.2. ¿Con qué objetivo se logra un campo de visión más grande? 4x 5.4.3. ¿Con qué objetivo se observan mejor los detalles de una imagen? Entre más capacidad tenga el lente, mayor es la capacidad de ver, por ello el de 100x permite tener mejor una imagen más detallada. 5.4.4. Calcule el diámetro del campo de visión para aumentos de 10X, 40X del mismo cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado. Con el objetivo 10x, la imagen se aumenta muchas veces y el campo de visión es reducido 5.4.5. Compare la anchura del campo visual con cada uno de los tres objetivos. ¿Con cuál objetivo el campo de visión es mayor con el de mayor o menor aumento Con el de menor aumento 4x 6.
Realice en el menú Ejercitación/la simulación principios
6.1.¿Cuándo se observa una letra o un objeto asimétrico cómo se observa su posición en el ocular al compararlo con la visión en directa sobre la platina? La imagen se ve inversa como si se viera a través de un espejo 6.2.¿Al mover el portaobjetos de derecha a izquierda a qué lado se mueve la imagen? Al mover la platina a la derecha la imagen se mueve a la izquierda
6.3. ¿Al acercar el portaobjetos hacia usted, hacia dónde se mueve la imagen? Al acercarlo a nosotros la imagen se aleja 7. Realice la simulación: comprobación de los poderes o capacidades del microscopio óptico 7.1.¿Cómo se manifiesta el poder de aumento al observar la letra? El poder del aumento se manifiesta al permitir ampliar la imagen, agrandando así el tamaño del objeto .la ampliación es igual al producto del aumento del lente ocular. 10x X4x= 40 número de veces que aumento el objeto, cada objetivo ocular tiene gravado el número de veces que aumento la imagen 7.2.Calcule el diámetro del campo de visión para un aumento de 4x en un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado. Contar el número de milímetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos líneas es un milímetro) y estimar aproximadamente la fracción sobrante, si la hay. El resultado será el diámetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular). Para calcular el diámetro del campo de visión para un determinado aumento, hay que seguir los siguientes pasos:
1: recortar un cuadro de 1cm de lado de papel milimetrado 2: ponerlo sobre la abertura central del portaobjetos 3: observando por el ocular y con el objetivo de 4x, mover la muestra hasta lograr que la línea 0 mm quede en el borde izquierdo del campo visual 4: enfocar con el objetivo de menor aumento 4x hasta que se vea con claridad. Enfocar la preparación situarla a la distancia del objetivo que permite su observación
nítida. Esta distancia se conoce como distancia de trabajo y es tanto menor cuanto mayor es el poder de aumento del objetivo. 5: medir el campo visual haciendo coincidir una de las líneas del papel milimetrado con el borde del campo de visión. 6: contar el número de milímetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos líneas es un milímetro) y estimar aproximadamente la fracción sobrante. Si la hay el resultado será del diámetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular) 7: si queremos calcular el diámetro del campo de visión para aumentos mayores. Hay que tener en cuenta que cuanto mayor sea el aumento, el campo será menor, es decir se verá menos de la muestra que estamos observando. De forma que si el aumento es el doble el campo será la mitad, si el aumento es el triple, el diámetro será la tercera parte etc (inversamente proporcionales), por tanto bastara con realizar un sencillo cálculo matemático para saber el nuevo diámetro. Así se puede calcular los diámetros de objetos microscópicos, células, amibas, entre otros B: calcule el diámetro del campo de visión para aumentos de 10x 40 x del mismo cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado
7.3.¿Cuál es la utilidad del microscopio? Es muy útil para observar cosas que no se ven a simple vista como bacterias, células, partículas que a simple vista no se ven etc. 7.4.¿En qué montaje se observó mejor el poder de penetración? En el montaje de 40 X siendo este último donde más penetración se tiene. 8.
Realice la simulación: comprobación de los principios ópticos del microscopio Conteste las siguientes preguntas:
8.1. Al observar la letra asimétrica e ¿Se ve invertida, o en la misma posición en que estaría si se viera a simple vista? ¿Parece como si se viera por un espejo? La letra se observa invertida 8.2. ¿Al mover la preparación hacia la derecha? ¿Hacia dónde se mueve la imagen? Se desplaza hacia la izquierda 8.3. ¿Al alejar el portaobjeto o la muestra de usted hacia donde se nueve la imagen? Se mueve hacia adelante, se acerca la muestra 8.4. ¿Si la distancia focal es mayor el tamaño del objeto es mayor o menor?
Es menor. Más pequeño Al terminar de desarrollar individualmente las simulaciones de ejercitación usted debe ingresar al foro colaborativo en el aula del curso, socializar sus respuestas y compararlas con sus 4 compañeros de grupo, con quienes se pondrá de acuerdo para elaborar un informe grupal consolidado, el cual enviarán al foro para su realimentación y calificación por el tutor. Nota: Para elaborar el informe tenga en cuenta la Rúbrica con los parámetros para calificación
Bibliografía
Material de apoyo enviado por tutores
Protocolo de laboratorio, Curso biología celular y molecular
Simulador
https://canal.unad.edu.co/laboratorio/interna/tarea.html
Karp, G. (2009). Biología Celular y Molecular. Conceptos y Experimentos Quinta Edición. México: Ed. McGraw-Hill. Recuperado de http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2053/book.aspx?i=419&pg= Curtis, H. (2007). Biología. Bogotá: Ed. Panamericana. Recuperado de http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2055/VisorEbookV2/Ebook/9789500605502