Spiralne Bakterije - Spirohete e181v

Spirohete • Gram negativne, spiralne

• dužina 5-30 mm • boje se solima srebra • teško se kultivišu

Spiralne bakterije - spirohete • u periplazmatskom prostoru su

aksijalni filamenti (unutrašnje flagele, endoflagele)

Transmission electron microscope image of a crosssection of T. Pallidum. OE - outer envelope. AF - axial filament. WM - cell wall membrane. BF - body fibrils

• Spirochaetaceae  Treponema  Borrelia

 Leptospira

Rod Treponema (4-14 pravilno raspoređenih zavoja) Treponema pallidum subspecies pallidum Treponema pallidum subspecies pertenue Treponema pallidum subspecies endemicum Treponema carateum

Treponema pallidum in the testis of an experimentally infected rabbit

Treponema pallidum subspecies pallidum • • • • •

teško se boji mikroskopiranje u tamnom polju u tečnoj podlozi se kreće ne kultiviše se dužina 5-15 mm

• T. pallidum ima spoljašnji omotač • Unutar omotača nalazi se spoljašnja membrana koja sadrži peptidoglikan • Endoflagele počinju na svakom kraju bakterije i obavijaju se oko nje • Unutar endoflagela nalazi se unutrašnja membrana • U blizini unutrašnje membrane nalazi se niz citoplazmatskih tubula • Razmnožavaju se poprečnom deobom

• spirale su uvek udaljene jedna od druge za 1 mikrometar • bakterija neprekidno rotira oko svojih endoflagela (sinusoidni pokreti) • može da formira pun krug • spirale se uočavaju imunofluorescentnim bojenjem ili u tamnom polju • u tkivu se uočavaju impregnacijom sa solima srebra

• Treponema pallidum nije kultivisana in vitro • U krvi ili plazmi, na 40C, mogu da žive 24 časa • Vreme deobe 30 sati • Za laboratorijske potrebe sojevi se mogu održavati u ćelijama testisa kunića

Faktori virulencije • • • •

molekuli koji omogućavaju adherenciju hijaluronidaza omotač od fibronektina transmembranski proteini i lipoproteini na spoljašnjoj membrani

Sifilis (lues) • polno prenosiva bolest • transplacentarno (kongenitalni sifilis)

•

In the UK in 2005, there were 2390 new cases of infectious syphilis in men and 417 in women.1 Those infected were predominantly in the 25-34 and 35-44 age groups. References: • Diagnoses of selected STIs by region, sex and age group. United Kingdom: 1996 2005 Health Protection Agency, July 2006.

• Samo čovek može da oboli od sifilisa • Lezije se javljaju na koži i sluzokoži genitalija • Spirohete se razmnožavaju na mestu ulaska (lokalno) ali neke mogu da dođu i do regionalnih limfnih čvorova i uđu u krvotok

• Primarni stadijum U roku od 2 do 10 nedelja posle infekcije, na inficiranom mestu (najčešće polni organi) javlja se papula od koje nastaje ulkus sa čvrstom, tvrdom osnovom (tvrdi šankr). U leziji dominiraju limfociti i plazma ćelije. Primarna lezija spontano zaceljuje.

• Sekundarni stadijum Nastaje kod nelečenih bolesnika, 2 do 10 nedelja nakon primarne lezije. Javljaju se crvena makulopapulozna ospa na bilo kom delu tela (šake, stopala) i blede papule ispod pazuha i u ustima. U ovom periodu bolesnik je najzarazniji. Kod jedne polovine bolesnika razvija se tercijarni stadijum.

• Tercijarni stadijum Posle latentnog perioda od 2 do 20 godina javljaju se oštećenja različitih sistema i organa. • Neurosifilis • Kardiovaskularni sifilis • Gume U ovom stadijumu bolesnik nije zarazan

• U 30% slučajeva sifilisna infekcija spontano napreduje ali se povlači bez lečenja • U drugih 30% nelečena infekcija ostaje latentna • Kod preostalih bolest dospeva u tercijarnu fazu

Timeline for the progression of syphilis

Kongenitalni sifilis

Kongenitalni sifilis • Javlja se ako je trudnica u prvom ili drugom stadijumu bolesti • Intrauterina smrt ploda • Kongenitalne malformacije • Latentna infekcija • Hutchinson-ov trijas (oštećenje na zubima, kostima, očima)

• Oboljenja slična sifilisu daju pozitivne serološke testove za sifilis ali se ne prenose polnim putem ili transplacentarno

Tropski sifilis (frambezija) • U tropskim zemljama sa vlažnom i toplom klimom • T. pallidum subsp. pertenue • Primarne lezije u vidu gnojnih papula se javljaju na rukama ili nogama • Mlađi od 15 godina • Retke su komplikacije na unutrašnjim organima • Terapija : Penicilin

Tropski sifilis (frambezija)

Bejel • T. pallidum subsp. endemicum • Afrika, Bliski istok, azija • Zarazne kožne lezije • Komplikacije retke • Penicilin

Pinta • • • •

Treponema carateum Meksiko, Centralna i Južna Amerika Negnojna papula Hiperpigmentisane lezije (nekoliko meseci kasnije) • Depigmentacija (nekoliko godina kasnije)

Zečiji sifilis • Infekcija kunića (prenosi se seksualnim putem) • Treponema cuniculi • Manje lezije na genitalijama • Morfološki se ne može razlikovati od Treponema pallidum

Dijagnoza • Uzorak sa lezija se uzima pomoću brisa ili ako su promene na koži suve natopiti ih fiziološkim rastvorom • Punktat regionalnih limfnih žlezda (1') • U svim limfnim žlezdama (3') • Serodijagnostika

Dijagnoza Osobine uzročnika

Postupak ispitivanja

Mikroskopske

Tamno polje, imunofluorescenca Ne ispituje se

Kulturelne

Fiziološko-biohemijske Ne ispituje se Antigenske

Detekcija antitela u serumu

• Mikroskopiranje • Nativni preparat • Mikroskopiranje u tamnom polju • Fiksiran preparat se mikroskopira nakon bojenja metodom imunofluorescence

T. pallidum – mikroskopiranje u tamnom polju

• Serološki testovi su pozitivni u sekundarnom stadijumu i kasnije • Serološki testovi - Nespecifični (netreponemalni), za skrining - Specifični (treponemalni), kao potvrdni

Nespecifični dijagnostički testovi • Antigen: kardiolipin goveđeg srca • Dokazuju se antikardiolipinska antitela koja nastaju na fosfolipide koji se oslobađaju iz oštećenih ćelija • Wassermann-ov test • Zasniva se na reakciji vezivanja komplementa

• Antigen (kardiolipin) • Serum bolesnika (inaktiviran komplement) • Titrirani komplement • Senzibilisani eritrociti

Flokulacioni testovi • Jednostavniji od prethodnog • VDRL (Veneral Disease Research Laboratory), inaktivirati komplement • RPR (karbonske partikule, rapid plasma reagin) • Kahn-ov • Reakcija kardiolipin-antikardiolipinska antitela ispoljava se nastankom taloga (flokula) koje su vidljive golim okom

Specifični serološki testovi • Dokazuju se antitreponemska antitela • TPI (Treponema Pallidum Imobilization test)-Nelsonov test • Antigen: žive, pokretne treponeme • Serum bolesnika • Komplement • Pravi se nativni preparat i određuje procenat nepokretnih ćelija

KRP (Kolmer-Reiter test) • Antigen je napravljen iz lizata nepatogenog soja treponeme • Reakcija vezivanja komplementa

FTA-ABS test • Visoko specifičan i osetljiv test • Antigen • Komercijalni setovi sadrže mikroskopske pločice sa antigenom • Serum • Sekundarna antitela obeležena fluorescentnom bojom

TPHA test • • • •

Treponema pallidum hemagglutination test Antigen se konjuguje sa ovčjim eritrocitima Serum Pojava hemaglutinina

• Profilaksa • Lečenje (penicilin, kod osoba koje su alergične doksicilin ili tetraciklini)