Pruebas Bioquimicas 6e4c70

PRUEBAS BIOQUIMICAS

AGAR HIERRO DE KLIGLER (KIA) Y AGAR HIERRO TRIPLE AZÚCAR (TSI) •

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Diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de Glucosa (0.1%), Lactosa (1%), Sacarosa (1%), la producción de Gas a partir de glucosa y la de H2S que precipita como sulfuro férrico al reaccionar con el hierro. Cuando la fermentación da lugar a la formación de Bióxido de Carbono, este puede ser observado mediante la producción de gas. Producción de H2S

• FUNDAMENTO:

RESULTADOS • Pico rojo/fondo amarillo; K/A): Fermentador de glucosa. • Pico ácido/fondo ácido; A/A: Fermentador de glucosa, lactosa y sacarosa. • Pico Rojo/Rojo; K/K: No fermentador de azúcares. • Presencia de burbujas o ruptura del medio: m.o. productor de gas. • Ennegrecimiento del medio: producción de ácido sulfhídrico.

RESULTADOS

AGAR DE HIERRO Y LISINA (LIA) • Utilizado para diferenciar m.o. especialmente Salmonella spp, basado en la descarboxilación/desaminación de la lisina y en producción de H2S y gas. • Descarboxilación se lleva acabo en anaerobiosis. • Desaminación se lleva acabo en aerobiosis

• FUNDAMENTO:

RESULTADOS •

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Descarboxilación de la lisina: Prueba positiva: Pico violeta/fondo violeta (K/K) Prueba negativa: Pico violeta/fondo amarillo (K/A) Desaminación de la lisina: Pico rojizo/fondo amarillo: Cepas del genero Proteus, Providencia y algunas cepas de Morganella sp. (R/A) Producción de ácido sulfhídrico: Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el límite del pico y fondo)

MIO (MOVILIDAD, INDOL, ORNITINA) •

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Utilizado para la identificación de enterobacterias. La descarboxilación se produce en anaerobiosis, por lo que se lee en el fondo del tubo. Medio altamente nutritivo, debido a la presencia del extracto de levadura, peptona y tripteina.

RESULTADOS •

Movilidad: Resultado positivo: Presencia de turbidez o crecimiento más allá de la línea de la siembra.

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Descarboxilación de la ornitina: Resultado positivo: Color púrpura. Resultado negativo: Color amarillo.

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Prueba de Indol:

SIM (SULFHIDRICO, INDOL, MOVILIDAD) •

Es usado en la diferenciación e identificación de enterobacterias.

• FUNDAMENTO:

RESULTADOS •

Cepas móviles: Producen turbidez en el medio.

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Cepas inmóviles: El crecimiento se observa solo en la línea de la siembra.

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Cepas H2S positivas: Ennegrecimiento a lo largo de la línea de siembra o en todo el medio.

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Cepas H2S negativas: El medio permanece sin cambio de color.

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Cepas indol positivas: Desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo de Kovac´s o Erlich.

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Cepas indol negativas: Sin cambio de color.

AGAR CITRATO DE SIMMONS • •

Diferenciación de enterobacterias El desdoblamiento del citrato por las bacterias comprende una enzima denominada: Citritasa (citrato-oxalacetatoliasa) o citrato desmolasa/citrato permeasa. La enzima requiere un sustrato para su actividad y este es proporcionado por el magnesio o manganeso.

RESULTADOS

UREA • Medio utilizado para la identificación de m.o. en base a la actividad de la enzima ureasa. En particular útil para diferenciar Proteus spp del resto de las enterobacterias.

MALONATO