Folato b6i60

ES system

Folate 7K60

B7K6Z3 34-8643/R3

Folate Lea atentamente este prospecto antes de utilizar este producto. No se puede garantizar la fiabilidad de los resultados del ensayo si no se siguen exactamente las instrucciones indicadas en este prospecto.

Clave de los símbolos utilizados Número de referencia

Número de lote

Producto sanitario para diagnóstico in vitro

Fecha de caducidad

Almacénese entre 2 °C y 8 °C

Número de control Cubetas de reacción

ATENCIÓN: ver instrucciones de uso.

Copas de muestra Número de serie

Consultar instrucciones de uso

Fabricante

ABBOTT Diagnostics Division

Septos (tapones de protección) Tapones para los reactivos Lote de reactivos

Si desea una explicación más detallada sobre los símbolos utilizados para cada componente, consulte el apartado REACTIVOS. 1

NOMBRE

REACTIVOS

ARCHITECT Folate

Equipo de reactivos, 100 tests/500 tests NOTA: algunas presentaciones del equipo de reactivos no se encuentran disponibles en todos los países ni para utilizar con todos los ARCHITECT i Systems. Si desea más información, póngase en o con su distribuidor local. Equipo de reactivos ARCHITECT Folate (7K60-22, 7K60-27, 7K60-32) 1 o 4 frascos (6,6 ml para 100 test por frasco/ • 27,0 ml para 500 test por frasco) de anticuerpo (monoclonal de ratón) antiproteína folato-ligante acoplado a micropartículas de afinidad unida a proteína folato-ligante (bovina), en tampón TRIS con estabilizantes proteínicos (albúmina humana [obtenida de donaciones, sin reactividad para el HBsAg, ni para el RNA del VIH-1 ni el antígeno del VIH-1, ni reactividad de anticuerpos anti-VHC ni anti-VIH-1/VIH-2] y de cabra). Concentración mínima: > 0,1% de partículas sólidas. Conservante: agentes antimicrobianos. 1 o 4 frascos (29,0 ml para 100 test por frasco/29,0 ml • para 500 test por frasco) de conjugado de ácido pteroico (PTA) marcado con acridinio en tampón MES con estabilizante proteínico (porcino). Concentración mínima: 4 ng/ml. Conservante: agentes antimicrobianos. 1 o 4 frascos (5,7 ml para 100 test por • frasco/25,3 ml para 500 test por frasco) de diluyente específico del ensayo Folate que contiene tampón borato. Conservante: agentes antimicrobianos. 1 o 4 frascos (50,2 ml para • 100 tests/50,2 ml para 500 tests) de reactivo de pretratamiento 1 que contiene hidróxido de potasio. 1 o 4 frascos (6,6 ml para 100 tests/ • 27,0 ml para 500 tests) de reactivo de pretratamiento 2 Folate que contiene ditiotreitol (DTT) en tampón de ácido acético con EDTA. 1 o 4 frascos (5,5 ml para 100 test por frasco/ • 25,9 ml para 500 test por frasco) de diluyente de muestra Folate que contiene tampón TRIS con estabilizantes proteínicos (albúmina humana [obtenida de donaciones, sin reactividad para el HBsAg, ni para el RNA del VIH-1 ni el antígeno del VIH-1, ni reactividad de anticuerpos anti-VHC ni anti-VIH-1/VIH-2]). Conservante: azida sódica.

FINALIDAD DE USO ARCHITECT Folate es un inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas de proteína folato-ligante para la determinación cuantitativa de folato en suero, plasma y eritrocitos humanos en el ARCHITECT i System.

RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO Los folatos son una clase de compuestos vitamínicos derivados del ácido pteroilglutámico (PGA) que actúan en una amplia variedad de procesos metabólicos como cofactores en la transferencia enzimática de unidades constituidas por un átomo de carbono.1,2 El metabolismo del monocarbono en el que intervienen los folatos constituye una de las reacciones bioquímicas celulares más importantes. Los folatos son necesarios para la síntesis de ácidos nucleicos y de proteínas mitocondriales, en el metabolismos de los aminoácidos y en otros procesos celulares que implican las transferencia de grupos compuestos por un solo átomo de carbono. Los folatos pueden actuar en dichos procesos como donantes o como receptores de carbono. Debido a que los distintos procesos metabólicos requieren grupos de carbono con grados diferentes de oxidación, las células contienen numerosos enzimas que cambian el estado de oxidación de los grupos de carbono que transportan los folatos2 lo que da como resultado la existencia de diferentes formas de folato metabólicamente activas. La forma predominante del folato circulante es el ácido 5-metiltetrahidrofólico (5-mTHF). En el proceso en el que se relaciona el metabolismo del ácido fólico y en la vitamina B12, un grupo metilo se transfiere del 5-mTHF a la cobalamina.3 La deficiencia del folato puede estar causada por una ingestión insuficiente, por malaabsorción debida a una enfermedad gastrointestinal, por utilización inadecuada debida a deficiencias enzimáticas o a terapia con antagonistas de folatos, por drogas como el alcohol y fármacos como los anticonceptivos orales y por una demanda excesiva de folato, como la que se observa durante el embarazo y en los trastornos de proliferación celular.4 Debido a que tanto la deficiencia de B12 como la de folato pueden causar una anemia megaloblástica (macrocítica), el tratamiento adecuado de esta afección requiere el diagnóstico diferencial de la deficiencia; por lo tanto, es necesario determinar los valores de vitamina B12 y de folato. Las concentraciones bajas de folato en suero reflejan la primera fase del balance negativo del folato y preceden a la reducción a nivel tisular.5 Los valores bajos de folato en eritrocitos reflejan la segunda fase de balance negativo del folato y guardan una relación estrecha con las concentraciones tisulares y la anemia megaloblástica.

Diluyente manual Diluyente manual ARCHITECT Folate (7K60-52) 1 frasco (4 ml) de diluyente manual Folate • que contiene tampón TRIS con estabilizantes proteínicos (albúmina humana [obtenida de donaciones, sin reactividad para el HBsAg, ni reactividad para el RNA del VIH-1 ni el antígeno del VIH-1, ni reactividad de anticuerpos anti-VHC ni anti-VIH-1/VIH-2]). Conservante: azida sódica.

PRINCIPIOS BIOLÓGICOS DEL PROCEDIMIENTO ARCHITECT Folate es un análisis de 2 pasos que utiliza la tecnología de inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) con protocolos de ensayos flexibles, denominados Chemiflex, para determinar la presencia de folato en suero, plasma y eritrocitos humanos.* Dos pasos del pretratamiento controlan la liberación de folato de la proteína folatoligante endógena. El paso de pretratamiento 1, la muestra y el reactivo de pretratamiento 2 (ditiotreitol o DTT) se aspiran y se dispensan en una cubeta de reacción (CR). En el paso de pretratamiento 2, una alícuota de la mezcla muestra/reactivo de pretratamiento 2 se aspira y se dispensa en otra CR. A continuación se añade el reactivo 1 de pretratamiento (hidróxido de potasio o KOH). Una alícuota de la muestra pretratada se transfiere a una tercera CR, a la que se le añaden micropartículas paramagnéticas recubiertas de proteína folato-ligante (FBP) y diluyente de ensayo específico. El folato presente en la muestra se une a las micropartículas recubiertas de FBP. Después del lavado, se añade el conjugado de ácido pteroico marcado con acridinio y se une a los puntos que no han sido ocupados por las micropartículas recubiertas de FBP. Las soluciones preactivadora y activadora se añaden a la mezcla de reacción produciéndose la reacción quimioluminiscente, la cual se mide en unidades relativas de luz (URL). Existe una relación inversamente proporcional entre la concentración de folato presente en la muestra y las URL detectadas por el sistema óptico ARCHITECT i †. * En el ensayo Folate RBC (folato de eritrocitos), un proceso manual de pretratamiento convierte el folato unido a los eritrocitos en folato medible. Después, estas muestras se procesan tal y como se ha descrito anteriormente. Si desea más información sobre el sistema y la tecnología del ensayo, consulte el capítulo 3 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. † i = inmunoanálisis

Otros reactivos Diluyente de lisis de eritrocitos ARCHITECT Folate RBC (7K60-42) 1 frasco (12,5 ml) de diluyente de lisis de • eritrocitos que contiene ácido cítrico e hidrocloruro de guanidina. Conservante: agente antimicrobiano. Reactivo de lisis Folate (9C13-60) • 4 frascos (285 mg - 385 mg cada uno) de reactivo de lisis Folate que contiene ácido ascórbico e hidrocloruro de guanidina. Solución preactivadora ARCHITECT i • Solución preactivadora que contiene 1,32 % (p./v.) de peróxido de hidrógeno. Solución activadora ARCHITECT i • Solución activadora que contiene hidróxido de sodio 0,35 N. Tampón de lavado ARCHITECT i • Tampón de lavado (concentrado o diluido) que contiene solución salina en tampón fosfato. Conservante: agente antimicrobiano.

ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES • •

2

Para uso en diagnóstico in vitro. No se puede garantizar la fiabilidad de los resultados del ensayo si no se siguen exactamente las instrucciones indicadas en este prospecto.

Precauciones de seguridad •

•

•

•

•

NOTA: El equipo de reactivos ARCHITECT Folate se envía refrigerado y, en cuanto se recibe, se debe almacenar a una temperatura entre 2 °C y 8 °C. Si desea más información, consulte el apartado Precauciones de manipulación de este prospecto. • El reactivo de lisis Folate sin reconstituir se debe almacenar entre 15 °C - 30 °C. Después de la reconstitución, almacene el reactivo de lisis Folate a una temperatura entre 2 °C - 8 °C hasta un máximo de 7 días. Anote la fecha de caducidad del reactivo de lisis Folate reconstituido en el lugar previsto en el frasco. No lo utilice una vez transcurrida la fecha de caducidad. • Si se almacenan y se manejan según las instrucciones, los reactivos se mantienen estables hasta la fecha de caducidad. • El equipo de reactivos ARCHITECT Folate se puede almacenar en el sistema ARCHITECT i durante un máximo de 30 días. Transcurrido este período de tiempo, deséchelo. Si desea más información sobre el control del tiempo de almacenamiento en el sistema, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. • Los reactivos se pueden almacenar dentro y fuera del ARCHITECT i System. Si retira los reactivos del sistema, almacénelos a una temperatura entre 2 °C y 8 °C (con los septos y los tapones para los reactivos) en posición vertical. Si almacena los reactivos fuera del sistema, se recomienda que los guarde en sus bandejas y cajas originales para asegurarse de que se almacenan en posición vertical. Si el frasco de micropartículas no se almacena en posición vertical (con un septo instalado) durante el almacenamiento refrigerado fuera del sistema, el equipo de reactivos se debe desechar. Después de retirar los reactivos del sistema, debe realizar una lectura para actualizar el tiempo de estabilidad de los reactivos en el sistema.

ATENCIÓN: este producto contiene componentes de origen humano infecciosos o potencialmente infecciosos. Si desea una enumeración más detallada, consulte el apartado REACTIVOS de este prospecto. Al no existir métodos de análisis que garanticen la inocuidad de materiales de origen humano o de microorganismos inactivados, todos los materiales de origen humano se deben considerar potencialmente infecciosos y se deben manejar según las prácticas de seguridad biológica apropiadas. El reactivo 1 de pretratamiento Folate que contiene hidróxido de potasio (KOH) y ha sido clasificado por las directivas de la Comunidad Europea (CE) como: corrosivo (C). A continuación se indican las frases relativas a los riesgos (R) y medidas de seguridad (S). R34 Provoca quemaduras. S26 En caso de o con los ojos, lávense inmediata y abundantemente con agua y acuda a un médico. S35 Elimínense los residuos del producto y sus recipientes con todas las precauciones posibles. S36/37/39 Úsense indumentaria y guantes adecuados y protección para los ojos/la cara. S45 En caso de accidente o malestar, acuda inmediatamente al médico (si es posible, muéstrele la etiqueta). Este producto contiene azida sódica; para una lista específica, consulte el apartado REACTIVOS. En o con ácidos libera gases muy tóxicos. Elimínense los residuos del producto y sus recipientes con todas las precauciones posibles. Para aquellos productos que no hayan sido clasificados como peligrosos según la directiva europea 1999/45/EC, versión corregida, la ficha de datos de seguridad está a disposición del profesional. Si desea más información sobre la eliminación correcta de la azida sódica y las precauciones de seguridad durante el funcionamiento del sistema, consulte el capítulo 8 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

Indicaciones de descomposición de los reactivos Si el valor de un control se encuentra fuera del intervalo especificado, puede ser indicio de una descomposición de los reactivos o de errores técnicos. Los resultados de estos análisis no son válidos y se deben repetir. Puede ser necesario calibrar de nuevo. Si desea más información sobre los procedimientos de solución de problemas, consulte el capítulo 10 del manual del operaciones del sistema ARCHITECT.

FUNCIONAMIENTO DEL INSTRUMENTO •

Precauciones de manipulación • No utilice los equipos de reactivos una vez transcurrida la fecha de caducidad. • No mezcle entre sí reactivos de equipos de reactivos diferentes. • Antes de cargar el equipo de reactivos Folate en el sistema por primera vez, mezcle el frasco de micropartículas para resuspender las micropartículas que se hayan asentado durante el envío. Si desea más información sobre cómo mezclar las micropartículas, consulte el apartado PROCEDIMIENTO, subtítulo Procedimiento del ensayo, de este prospecto. • Se DEBEN utilizar septos (tapones de protección) para evitar la evaporación y la contaminación de los reactivos y para asegurar su buen estado. No se puede garantizar la fiabilidad de los resultados de este ensayo si los septos no se manejan según las instrucciones indicadas en este prospecto. • Una exposición prolongada del Reactivo de pretratamiento 1 Folate al aire sin septo puede comprometer el rendimiento. • Para evitar la contaminación, utilice guantes limpios cuando coloque un septo en un frasco de reactivo destapado. • Una vez que haya colocado un septo en un frasco de reactivo abierto, no invierta el frasco, ya que el reactivo se puede derramar y esto podría afectar a los resultados del análisis. • Con el tiempo, los residuos líquidos se pueden secar en la superficie del septo (tapón de protección). Generalmente se trata de sales secas que no afectan al funcionamiento del ensayo. • Si desea más información sobre las precauciones de manipulación durante el funcionamiento del sistema, consulte el capítulo 7 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

•

•

•

Almacenamiento

•

El equipo de reactivos ARCHITECT Folate, el diluyente de lisis de eritrocitos Folate RBC y el diluyente manual Folate se deben almacenar entre 2 °C - 8 °C y se pueden utilizar inmediatamente después de sacarlos del refrigerador. Si desea más información, consulte el apartado Precauciones de manipulación de este prospecto. 3

Antes de realizar el ensayo ARCHITECT Folate (ensayo n° 737) y/ o Architect Folate RBC (ensayo n° 738), se debe(n) instalar el/los fichero(s) del CD ROM del ensayo en el ARCHITECT i System. Si desea más información sobre la instalación del fichero del ensayo y sobre la visualización y la modificación de los parámetros del ensayo, consulte el capítulo 2 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. El procedimiento 6041 Daily Maintenance (mantenimiento diario) de ARCHITECT (versión 5 o siguientes) de ARCHITECT i System. Si desea más información sobre la instalación y el borrado de los procedimientos de mantenimiento, consulte el capítulo 2 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. Se debe realizar el procedimiento de mantenimiento 6041 Daily Maintenance (mantenimiento diario) (versión 5 o siguientes) de ARCHITECT como mínimo una vez cada 24 horas. Aquellos laboratorios que procesen un volumen mayor de análisis de B12 y folato en un único módulo deberán realizar este procedimiento como mínimo una vez en el transcurso de 24 horas. • Si se analiza B12 y folato en un único módulo y se procesan en el transcurso de 24 horas > 100 tests de B12 o > 100 tests de folato, realice el procedimiento 6041 Daily Maintenance (mantenimiento diario) (versión 5 o siguiente) cada 100 tests de B12 o de folato procesados. • Si desea más información, consulte el apartado LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO. NOTA: Si se analiza folato pero no B12, el procedimiento 6041 Daily Maintenance (mantenimiento diario) se debe realizar sólo una vez cada 24 horas independientemente del número de tests de folato que se procesen. Si se sospecha la existencia de contaminación microbiana al analizar el ensayo ARCHITECT Folate en el ARCHITECT i2000/ i2000SR System debido a desviaciones en los resultados o a errores de calibración con los siguientes códigos de error: • 1402 - Fallo de calibración del ensayo (_Folate/_FolateRBC), número 737/738, los calibradores no están cargados correctamente • 1206 - Fallo de calibración del ensayo (_Folate/_FolateRBC), número 737/738, concentración demasiado alta para Cal A.

1120 - Fallo de calibración del ensayo (_Folate/_FolateRBC), número 737/738, el ajuste de la respuesta del calibrador A es demasiado bajo. debe seguir las instrucciones siguientes para asegurar la fiabilidad de los resultados: • e con el representante local para que lleve a cabo el procedimiento 2180 Internal Decontamination (descontaminación interna) de su ARCHITECT i System. Si el analizador está conectado a un módulo para la reconstitución automática (ARM), se debe realizar también el procedimiento 2182 ARM Decontamination (descontaminación de ARM). • Realice el procedimiento diario de descarga del tampón de lavado (consulte el apéndice A). • Puede que sea necesario repetir el procedimiento de descontaminación si persiste la contaminación microbiana. • Si desea más información, consulte el apartado LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO. Cuando vaya a configurar el ordenador central para el ensayo Folate RBC, establezca las diluciones preprogramadas de fábrica correspondiente: • Si va analizar muestras o controles de sangre, seleccione la dilución preprogramada “RBC DIL”. • Si va a analizar otros controles que no sean de sangre, seleccione “UNDILUTED”. Si desea más información sobre la impresión de los parámetros del ensayo, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. Si desea más información sobre el funcionamiento del sistema, consulte el Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. Las unidades de resultados programadas de fábrica para el ensayo ARCHITECT Folate son ng/ml. Se pueden elegir las unidades de resultados alternativas, nmol/l modificando el parámetro "Unidades del resultado de la concentración". El factor de conversión utilizado por el sistema es 2,265. •

•

•

• •

Muestras de suero: • Con el ensayo ARCHITECT Folate (ensayo n° 737) se pueden utilizar muestras de suero humano (incluido el suero recogido en tubos con separador). Siga las instrucciones de uso del fabricante de los tubos de recogida de suero. • Antes de centrifugar, compruebe que la formación del coágulo en las muestras de suero se haya completado. Algunas muestras, especialmente las de pacientes sometidos a terapia con anticoagulantes o a terapia trombolítica, pueden presentar tiempos de coagulación prolongados. Si la muestra se centrifuga antes de que se complete la formación del coágulo, la presencia de fibrina puede causar resultados erróneos. • Inmediatamente después de la formación del coágulo, retírelo del suero. Si el análisis no se realiza inmediatamente, las muestras de suero se deben almacenar a una temperatura entre 2 °C - 8 °C hasta 7 días o congeladas (a una temperatura igual o inferior a -10 °C) hasta 30 días antes del análisis. Muestras de plasma: • Con el ensayo ARCHITECT Folate (ensayo n° 737) se puede utilizar plasma humano (recogido en tubos con heparina de litio). Siga las instrucciones del fabricante de los tubos de recogida de muestras de plasma para su procesamiento. No se ha verificado el uso de otros anticoagulantes con el ensayo ARCHITECT Folate. • No utilice plasma humano recogido en tubos con EDTA tripotásico. • Una vez recibido, retire los eritrocitos del plasma lo antes posible.7 Si el análisis no se realiza inmediatamente, las muestras de plasma se deben almacenar a una temperatura entre 2 °C - 8 °C hasta 24 horas o congeladas (a una temperatura igual o inferior a -10 °C) hasta 7 días antes del análisis. Muestras de sangre: • Con el ensayo ARCHITECT Folate RBC (ensayo n° 738) se puede utilizar sangre humana (recogida en tubos EDTA tripotásico). Siga las instrucciones del fabricante de los tubos de recogida de muestras. No se ha verificado el uso de otros anticoagulantes con el ensayo ARCHITECT Folate RBC. • No utilice sangre recogida en tubos con heparina de litio. • Si el análisis no se realiza inmediatamente, las muestras de sangre se deben almacenar a una temperatura entre 2 °C - 8 °C hasta 24 días o congeladas (a una temperatura igual o inferior a -10 °C) hasta 7 días antes del análisis. • Para las mediciones de folato en eritrocitos, determine el hematocrito para cada muestra que se vaya analizar antes de su almacenamiento, y prepare un hemolizado de eritrocitos siguiendo las instrucciones del apartado Preparación del hemolizado de eritrocitos en el apartado PROCEDIMIENTO de este prospecto.

RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS PARA EL ANÁLISIS •

•

•

•

•

•

•

•

•

Las muestras de suero, sangre o plasma humanos que se vayan a analizar para la determinación de folato se deben proteger de la luz.6,7 Las muestras de suero o plasma se deben recoger de individuos en ayunas, ya que la ingestión de alimentos puede aumentar considerablemente la concentración de folato.7 El ARCHITECT i System no puede comprobar el tipo de muestra utilizado. Por lo tanto, el tiene la responsabilidad de comprobar que se haya utilizado el tipo de muestra adecuado con el ensayo ARCHITECT Folate o Folate RBC. Maneje con cuidado las muestras de pacientes para evitar la contaminación cruzada. Se recomienda el uso de pipetas o puntas de pipetas desechables. No utilice muestras hemolizadas. Las muestras de suero o plasma hemolizadas pueden producir concentraciones de folato falsamente elevadas. Para obtener resultados óptimos, las muestras de suero o plasma no deben presentar fibrina, eritrocitos ni partículas en suspensión. Las muestras de suero o plasma que contengan eritrocitos pueden producir concentraciones de folato falsamente elevadas. Para obtener resultados óptimos, compruebe que no haya burbujas en las muestras. Si las hubiese, retírelas con un bastoncillo antes del análisis. Para evitar la contaminación cruzada, utilice un bastoncillo nuevo para cada muestra. Se recomienda no someter las muestras a múltiples ciclos de congelación y descongelación. Las muestras se deben mezclar BIEN, después de descongelarlas, en un agitador de tubos tipo Vortex a BAJA velocidad o invirtiéndolas suavemente y centrifugar antes del uso para eliminar las partículas en suspensión, si las hubiere, y asegurar la reproducibilidad de los resultados. En caso de transporte, las muestras se deben preparar y etiquetar de acuerdo con las normativas vigentes que rigen el transporte de muestras y sustancias infecciosas. Las muestras se deben transportar congeladas a una temperatura igual o inferior a -10 °C y protegidas de la luz. Antes de congelarlas, se recomienda: • retirar el suero del coágulo o del tubo separador. • retirar los eritrocitos del plasma.

PROCEDIMIENTO Materiales suministrados • Equipo de reactivos ARCHITECT Folate 7K60-22, 7K60-27, 7K60- 32 Materiales necesarios pero no suministrados • CD-ROM de ensayos ARCHITECT i • 7K60-02 Calibradores ARCHITECT Folate • 7K60-12 Controles ARCHITECT Folate • 7K60-13 Controles bajos 5mTHF ARCHITECT Folate • 7K60-42 Diluyente de lisis de eritrocitos ARCHITECT Folate RBC • 7K60-52 Diluyente manual ARCHITECT Folate • 9C13-60 Reactivo de lisis Folate • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • Si desea más información sobre los materiales necesarios para los procedimientos de mantenimiento, consulte el capítulo 9 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. • Pipetas o puntas de pipetas (optativas) para dispensar los volúmenes especificados en la pantalla de peticiones de pacientes o de controles.

4

Determinación de folato en eritrocitos (RBC) Reconstitución del reactivo de lisis Folate • Reconstituya un frasco del reactivo de lisis Folate con 30 ml de agua destilada o desionizada. • Tape el reactivo e invierta el frasco para mezclar su contenido hasta que el reactivo se haya disuelto. El reactivo de lisis reconstituido se mantiene estable durante 7 días a una temperatura entre 2 °C y 8 °C. No lo utilice una vez transcurrida la fecha de caducidad. • Anote la fecha de caducidad del reactivo de lisis reconstituido en el lugar previsto en la etiqueta del frasco. Preparación del hemolizado de eritrocitos: mismo día del procedimiento • Mezcle el tubo con la muestra de sangre mediante la técnica de inversión o mezclándolo en un agitador de tubos tipo Vortex hasta que la muestra sea homogénea. • Pipetee 100 μl de la muestra de sangre a 1,0 ml de reactivo de lisis Folate reconstituido. • Mezcle por inversión o utilizando un agitador de tubos tipo Vortex y deje reposar a temperatura ambiente (entre 15 °C - 30 °C) durante 90 minutos (± 5 minutos). • Añada 100 μl de diluyente de lisis ARCHITECT Folate RBC a 100 μl de muestra hemolizada e inicie el ensayo en el plazo de dos horas.

≤ 3 horas en el sistema: 150 μl para el primer análisis con el ensayo ARCHITECT Folate más 35 μl para cada análisis adicional con el ensayo ARCHITECT Folate de la misma copa de muestra. • Si utiliza tubos primarios o con alícuotas, use las marcas de nivel de muestra para asegurarse de que haya suficiente muestra de paciente. Prepare los calibradores y los controles. • Antes de utilizar los calibradores, los controles y los controles bajos 5mTHF ARCHITECT Folate, consulte los prospectos de los calibradores y los controles ARCHITECT Folate. • Los volúmenes requeridos para los calibradores y los controles Folate se obtienen dispensando verticalmente en las copas de muestra correspondientes 6 gotas de cada calibrador ó 6 gotas de cada control. • NOTA: es muy importante volver a almacenar los calibradores, los controles y los controles bajos 5mTHF ARCHITECT Folate a las temperaturas correspondientes de almacenamiento inmediatamente después de su uso, tal y como se indica a continuación: •

•

Vuelva a colocar los calibradores en sus cajas y almacénelas a una temperatura igual o inferior a -10 °C. Vuelva a colocar los controles ARCHITECT Folate en sus cajas y almacénelas a una temperatura entre 2 °C y 8 °C. Almacene los controles bajos 5mTHF a una temperatura entre 2 °C y 8 °C en caso de que no se haya excedido la fecha de caducidad que se anotó en el frasco en el momento de la descongelación.

Procedimiento de ensayo (ensayos Folate y Folate RBC) • Antes de cargar el equipo de reactivos Folate en el sistema por primera vez, mezcle el frasco de micropartículas para resuspender las micropartículas que se hayan asentado durante el envío. • Invierta el frasco de micropartículas 30 veces. • Compruebe visualmente que las micropartículas del frasco se hayan resuspendido. Si las micropartículas continúan adheridas al frasco, siga invirtiendo el frasco hasta que éstas estén completamente resuspendidas. • Una vez que las micropartículas se hayan resuspendido, retire y deseche el tapón. Utilizando guantes nuevos, coja un septo (tapón de protección) del envase. • Coloque cuidadosamente el septo en el frasco. • Si las micropartículas no se resuspenden, NO UTILICE ESTE REACTIVO y póngase en o con el representante de Abbott. • Si lo considera necesario, realice una calibración. • Si desea más información sobre la petición de calibraciones, consulte el capítulo 6 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. • Solicite los ensayos en el sistema. • Seleccione el protocolo de ensayo correspondiente. • Si va a analizar una muestra de plasma o suero o un control, seleccione _Folate (ensayo n° 737, “UNDILUTED”). • Si va a realizar una dilución automática con una muestra de suero o plasma, seleccione el protocolo _Folate 1:2 (ensayo n° 737, “1:2”). • Si va a analizar una muestra o un control de sangre, seleccione _FolateRBC (ensayo n° 738, “RBC DIL”). • Si va a analizar otros controles que no sean de sangre con el ensayo Folate RBC, seleccione el protocolo no diluido de _FolateRBC (ensayo n° 738, “UNDILUTED”). • Si desea más información sobre la petición de muestras de pacientes, calibradores y controles y sobre el funcionamiento del sistema en general, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. • Cargue el equipo de reactivos Folate en el sistema ARCHITECT i. Compruebe que se encuentren todos los reactivos del ensayo necesarios. Asegúrese de que todos los frascos de reactivos tengan septos (tapones de protección). Si desea más información sobre cómo cargar reactivos, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. • El sistema calcula el volumen mínimo de la copa de muestra y lo imprime en el informe de la lista de peticiones. No se pueden analizar más de 10 replicados de la misma copa de muestra. Para evitar al máximo la evaporación, asegúrese de que haya el volumen adecuado en la copa de muestra antes de realizar el ensayo. • Prioridad: 85 μl para el primer análisis con el ensayo ARCHITECT Folate más 35 μl para cada análisis adicional con el ensayo ARCHITECT Folate de la misma copa de muestra.

•

• •

•

Cargue las muestras. • Si desea más información sobre cómo cargar las muestras, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. Pulse la tecla PROCESAR. Si desea más información sobre los principios del funcionamiento, consulte el capítulo 3 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. Para garantizar un funcionamiento óptimo, es importante realizar los procedimientos habituales de mantenimiento descritos en el capítulo 9 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. El mantenimiento podrá ser más frecuente si los procedimientos habituales de mantenimiento de su laboratorio así lo requieren.

Procedimientos de dilución de muestras (sólo para determinaciones de folato en suero y plasma) Las muestras con concentraciones de folato en suero o plasma superiores a 20,0 ng/ml aparecen señalizadas con el código “ > 20.0” y se pueden diluir utilizando el procedimiento de dilución automática o el procedimiento de dilución manual. Procedimiento de dilución automática • Si se utiliza protocolo de dilución automática (ensayo n° 737, protocolo 1:2), el sistema realiza una dilución 1:2. El sistema utiliza el factor de dilución para calcular automáticamente la concentración de la muestra antes de la dilución y éste es el resultado que se proporciona. Procedimiento de dilución manual • La dilución recomendada para ARCHITECT Folate es de 1:2. Se recomienda realizar diluciones que no excedan 1:4. • Para realizar una dilución al 1:2, añada 100 μl de la muestra de paciente a 100 μl de diluyente manual ARCHITECT Folate (7K60- 52). • El debe introducir el factor de dilución en la pantalla de peticiones de muestras de pacientes o controles. El sistema utiliza este factor de dilución para calcular automáticamente la concentración de la muestra antes de la dilución y éste es el resultado que se proporciona. La dilución se debe efectuar de modo que los resultados diluidos sean superiores a ≥ 0,8 ng/ml. • Si desea más información sobre la petición de diluciones, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

5

Calibración • Los ensayos ARCHITECT Folate y ARCHITECT Folate RBC se deben calibrar por separado. • Para realizar una calibración del ensayo ARCHITECT Folate, analice los calibradores A a F por duplicado. Se debe analizar una única muestra de todas las concentraciones de los controles de folato para evaluar la calibración del ensayo. Asegúrese de que los valores de los controles del ensayo se encuentren dentro de los intervalos de concentración especificados en los prospectos de los controles. Los calibradores se deben cargar con prioridad. • Intervalo de valores de los calibradores: 0,0 ng/ml a 20,0 ng/ml. • Una vez que la calibración del ensayo ARCHITECT Folate haya sido aceptada y almacenada, las muestras se analizan según la curva de calibración apropiada, sin tener que volver a calibrar el ensayo, excepto cuando: • Se utilice un equipo de reactivos con distinto número de lote. • Los controles no se encuentren dentro del intervalo especificado. • Si desea más información sobre cómo realizar una calibración del ensayo, consulte el capítulo 6 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

Cálculo de la concentración corregida de folato en eritrocitos (solo para el ensayo Folate RBC): En la mayoría de los casos, las concentraciones de folato en suero o plasma son muy bajas en comparación con las concentraciones en eritrocitos. Es posible que la concentración de folato en suero o plasma se encuentre dentro de o por encima del intervalo esperado mientras que la concentración de folato en eritrocitos se encuentra por debajo del intervalo de valores de referencia esperado. Para corregir la concentración de folato en suero o plasma, se debe efectuar el cálculo siguiente: Concentración corregida de folato en eritrocitos (ng/ml) = Concentración Resultado del ensayo de folato en 100 – Hematocrito (%) – ARCHITECT Folate* x Hematocrito (%) eritrocitos (ng/ml) (ng/ml) * Resultado en suero o plasma Ejemplo: Concentración de folato en eritrocitos = 234,0 ng/ml Resultado impreso del ensayo ARCHITECT Folate = 9,5 ng/ml Hematocrito (%) = 47

[

PROCEDIMIENTOS DE CONTROL DE CALIDAD

[

[ [

100 – 47 47

]]

]]

El requisito de control recomendado para el ensayo ARCHITECT Folate es el análisis de una muestra única de cada una de las concentraciones de los controles cada 24 horas, cada día de su uso. Si los procedimientos de control de calidad de su laboratorio así lo requieren, se pueden utilizar los controles más frecuentemente para verificar los resultados del análisis. Asegúrese de que los valores de los controles del ensayo se encuentren dentro de los intervalos de concentración especificados en el prospecto de los controles.

Las unidades de resultados de las fórmulas y ejemplos son ng/ml. Si las unidades seleccionadas para el ensayo ARCHITECT Folate son nmol/l, las unidades del resultado final serán nmol/l.

Verificación de las especificaciones analíticas del ensayo Si desea más información sobre los protocolos de verificación de las especificaciones detalladas en el prospecto, consulte el Apéndice B del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. El ensayo ARCHITECT Folate pertenece al grupo 1 de métodos.

•

234,0 ng/ml –

•

•

El ensayo ARCHITECT Folate utiliza un método de cálculo de datos de ajuste a una curva logística de 4 parámetros (4PLC, Y ponderado) para generar la curva de calibración. Unidades de resultados alternativas • Las unidades de resultados programadas de fábrica para el ensayo ARCHITECT Folate son ng/ml. Cuando se seleccionan las unidades de resultados alternativas, nmol/l, el factor de conversión utilizado por el sistema es 2,265. • Fórmula de conversión: (concentración en ng/ml) x (2,265) = nmol/l

•

•

Cálculo de la concentración de folato en eritrocitos (solo para el ensayo Folate RBC): Los resultados de las muestras analizadas con el ensayo Folate RBC (ensayo n° 738 utilizando el protocolo “RBC DIL”) se multiplican por 22. Así, el resultado obtenido se corrige automáticamente para las diluciones necesarias en la preparación del hemolizado de eritrocitos. Para calcular la concentración de folato en eritrocitos a partir del valor impreso del ensayo ARCHITECT Folate RBC, efectúe el cálculo siguiente:

=

= 223,3 ng/ml

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

RESULTADOS

Concentración de RBC Folate (ng/ml)

9.5 x

•

Resultados impresos (ng/ml) del ensayo ARCHITECT RBC x 100 Hematocrito (%) •

Ejemplo: Resultado impreso del ensayo ARCHITECT Folate RBC = 110,0 ng/ml Hematocrito (%) = 47

•

110,0 x 100 = 234,0 ng/ml 47

•

6

Los resultados con fines diagnósticos de ARCHITECT Folate se deben utilizar junto a otros datos, por ej. síntomas, resultados obtenidos de otros análisis, impresiones clínicas, etc. Si la concentración de folato no se corresponde con los datos clínicos, se recomienda la realización de análisis posteriores para confirmar el resultado. Las muestras de pacientes que hayan recibido preparados a base de anticuerpos monoclonales de ratón con fines diagnósticos o terapéuticos pueden contener anticuerpos humanos antirratón (HAMA). Estas muestras pueden dar valores falsamente elevados o disminuidos al analizarlas con equipos de ensayo que empleen anticuerpos monoclonales de ratón.8,9 Los anticuerpos heterófilos presentes en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas del reactivo e interferir en los inmunoanálisis in vitro.10 Aquellos pacientes habitualmente en o con animales o con productos con suero de origen animal pueden ser propensos a esta interferencia y dar valores anómalos. Muestras de suero o plasma que contengan eritrocitos pueden producir concentraciones de folato falsamente elevadas. Antes de su uso, estas muestras se deben centrifugar. Las muestras de suero o plasma hemolizadas pueden producir concentraciones de folato falsamente elevadas. Las muestras de suero y plasma de pacientes con nefropatía o insuficiencia renal (incluyendo a los pacientes sometidos a diálisis) pueden presentar diversos valores falsamente disminuidos en el ensayo ARCHITECT Folate, lo que puede derivar en una sobrerecuperación debida a la dilución. Por lo tanto, para valorar el folato en esto paciente con insuficiencia renal o fallo renal, se recomienda que se confirme los valores de ARCHITECT Folate inferiores al intervalo esperado mediante un método alternativo como, por ejemplo, el ensayo ARCHITECT Folate RBC. El metotrexato, la aminopterina y el ácido folínico (Leucovorina) son agentes quimioterapéuticos cuyas estructuras moleculares son similares al folato. Estos agentes presentan reactividad cruzada con la proteína folato-ligante en los ensayos de folato.11 Las muestras de folato que se vayan a analizar se deben proteger de la luz.6 La luz acelera la degradación del folato. Los resultados representativos del estudio se incluyen en los apartados VALORES ESPERADOS y CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DEL FUNCIONAMIENTO. Los resultados obtenidos en otros laboratorios podrían ser diferentes.

•

•

La acumulación en la sonda de la proteína desnaturalizada del paso de pretratamiento de muestras puede afectar a los resultados de otros ensayos en el analizador ARCHITECT. Se debe realizar el procedimiento de mantenimiento 6041 Daily Maintenance (mantenimiento diario) (versión 5 o siguientes) de ARCHITECT para eliminar este efecto. Si desea más información, consulte el apartado FUNCIONAMIENTO DEL INSTRUMENTO. Si los sistemas ARCHITECT i2000/i2000SR se contaminan con microbios que producen productos similares al folato, puede que falle la calibración del ensayo ARCHITECT Folate y/o haya desviaciones en los resultados. Estudios han determinado que el procedimiento 2180 Internal Decontamination (descontaminación interna) en el sistema ARCHITECT i System reduce la situación de contaminación, no obstante no evita que los microbios recolonicen al sistema. Se ha incorporado un procedimiento diario de descarga del tampón de lavado (consulte el apéndice A). El procedimiento de descontaminación junto con el procedimiento de descarga diaria del tampón de lavado, mostró una calibración estable del folato y del control de calidad al menos durante 30 días después de la contaminación. Desviaciones diarias en los resultados de pacientes debido al crecimiento microbiano (si lo hubiera) estará a una concentración aceptable siempre y cuando el control de calidad quede dentro del intervalo definido. Si desea más información, consulte el apartado FUNCIONAMIENTO DEL INSTRUMENTO.

Imprecisión del ensayo ARCHITECT Folate Lote de reacMuestra tivo

VALORES ESPERADOS Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio intervalo de valores de referencia normales y de deficiencia, según la población a la que atiende y los factores geográficos, de pacientes, dietéticos o medioambientales. Valores normales de folato Se realizó un estudio según el protocolo C28-A2 del CLSI.12 Se desconocía el estado nutricional de los donantes. No obstante, todas las muestras analizadas procedían de individuos estadounidenses aparentemente sanos, es decir, una población con aporte regular de folato en la dieta. Con el ensayo ARCHITECT Folate se analizaron 194 muestras de suero o plasma de individuos en ayunas para la detección de folato en suero o plasma. La concentración media de esta población fue de 11,43 ng/ml con un intervalo de valores aceptables entre 3,99 ng/ml y 31,78 ng/ml. Usando un análisis no paramétrico, el intervalo central del 95% de la población fue de 4,82 ng/ml a 18,99 ng/ml. Con el ensayo ARCHITECT Folate se analizaron 138 muestras de sangre de individuos para la detección de folato en eritrocitos (RBC). La concentración media de esta población fue de 244,30 ng/ml con un intervalo de valores aceptables entre 73,44 ng/ml y 694,01 ng/ml. Usando un análisis paramétrico, el intervalo central del 95% de la población fue de 99,79 ng/ml a 598,10 ng/ml.

Instrumento

n

Conc. Media (ng/ml)

Intraserial DE CV%

Total DE CV%

1

1

1

120

2,64

0,323

12,3 0,379

14,4

1

2

1

120

2,47

0,247

10,0 0,281

11,4

1

1

2

117

2,68

0,248

9,3 0,371

13,9

1

2

2

116

2,51

0,250

10,0 0,342

13,6

2

1

1

120

7,57

0,268

3,5 0,364

4,8

2

2

1

120

7,40

0,244

3,3 0,320

4,3

2

1

2

118

7,49

0,243

3,2 0,440

5,9

2

2

2

119

7,46

0,325

4,4 0,351

4,7

3

1

1

120 15,31

0,244

1,6 0,332

2,2

3

2

1

119 15,39

0,248

1,6 0,428

2,8

3

1

2

119 15,24

0,205

1,3 0,390

2,6

3

2

2

117 15,36

0,210

1,4 0,290

1,9

4

1

1

118

3,11

0,245

7,9 0,295

9,5

4

2

1

120

2,99

0,159

5,3 0,216

7,2

4

1

2

115

3,01

0,211

7,0 0,363

12,1

4

2

2

116

2,88

0,176

6,1 0,249

8,6

5

1

1

118

7,54

0,214

2,8 0,310

4,1

5

2

1

119

7,72

0,228

3,0 0,334

4,3

5

1

2

117

7,13

0,198

2,8 0,419

5,9

5

2

2

117

7,47

0,185

2,5 0,291

3,9

Linealidad de la dilución El ensayo ARCHITECT Folate se evaluó para calcular la linealidad de la dilución mezclando una serie de muestras con una concentración elevada de suero (de 15 ng/ml a 20 ng/ml) con otra serie de muestras con una concentración baja de suero (inferior a 3,5 ng/ml) para crear 11 mezclas de muestras. Todas las mezclas se analizaron con el ensayo ARCHITECT Folate. En este estudio, el ensayo ARCHITECT Folate mostró una linealidad media de ±7,5% entre 4,82 ng/ml y 15 ng/ml. En la tabla siguiente se resumen los resultados obtenidos en este estudio. Concentración (ng/ml) ID de la mezcla 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

Concentración de folato (ng/ml) Intervalo de valores aceptables en suero 4,82 a 18,99 Intervalo de valores aceptables en eritrocitos 99,79 a 598,10 La información que se menciona a continuación se ha extraído de la literatura existente: Deficiencia de folato La deficiencia de folato se suele asociar con concentraciones de suero inferiores a 3 ng/ml o a concentraciones de eritrocitos inferiores a 150 ng/ml.13,16 Las concentraciones de eritrocitos entre 150 ng/ml y 250 ng/ml en pacientes se asocian a una eritropoyesis megaloblástica. No obstante, es posible los pacientes con valores de folato con eritropoyesis normal tengan valores que queden dentro de este intervalo.13 En la mayoría de los casos, el diagnóstico de la deficiencia de folato no se puede determinar exclusivamente a partir de las concentraciones de folato en suero o eritrocitos y pueden ser necesarios análisis adicionales.13-15

Observada 17,48 16,63 15,58 14,77 13,07 11,65 10,07 8,21 6,50 4,80 3,35

Esperada 17,48 16,07 14,66 13,24 11,83 10,42 9,00 7,59 6,17 4,76 3,35

Porcentaje de recuperación* 100,0 103,5 106,3 111,6 110,5 111,8 111,9 108,2 105,3 100,8 100,0

Porcentaje de recuperación media: 106,3 Verificación de la dilución El ensayo ARCHITECT Folate se evaluó para verificar la dilución diluyendo al 1:2 y 1:4, según el protocolo manual, 3 muestras con concentraciones entre 20 ng/ml y 40 ng/ml. Estas diluciones se analizaron a continuación con el ensayo ARCHITECT Folate. Las 3 muestras se analizaron con el procedimiento de dilución automático. En este estudio, el ensayo ARCHITECT Folate mostró un porcentaje de recuperación media entre los métodos entre 98,9 ng/ml y 104,3 ng/ml. En la tabla siguiente se resumen los resultados obtenidos en este estudio.

CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DEL FUNCIONAMIENTO Imprecisión La imprecisión del ensayo ARCHITECT Folate se evaluó según el protocolo EP5-A2 del CLSI.17 Se analizaron por triplicado un de 3 muestras preparadas con proteínas en tampón (1, 2 y 3) y un de 2 muestras de suero humano procesado (4 y 5), 2 veces al día, durante 20 días, con dos analizadores, utilizando 2 lotes de reactivos y una única calibración para cada lote de reactivos. Los resultados obtenidos en este estudio demostraron que el ensayo ARCHITECT Folate muestra una imprecisión total con un CV menor o igual a 10% a lo largo del intervalo de valores de referencia entre 4,82 ng/ml y 20 ng/ml. Las muestras en el intervalo de valores entre 1,5 ng/ml y 4,81 ng/ml muestran una desviación estándar ≤ 0,58. En la tabla siguiente se resumen los datos obtenidos en este estudio. 7

Correlación del ensayo ARCHITECT Folate* Porcentaje de recuperación Autom. frente a manual Manual

Valor ID de Valor medio la sin diluir Método de observado muestra (ng/ml) dilución (ng/ml) 1:2 Automático 1 >20 30,32 (1:2) 100,7 Manual (1:2) 30,10 Manual (1:4) 28,32 Automático 2 >20 26,05 (1:2) 97,7 Manual (1:2) 26,68 Manual (1:4) 25,82 Automático 3 >20 29,37 (1:2) 98,2 Manual (1:2) 29,89 Manual (1:4) 28,97 Porcentaje medio de recuperación:

98,9

1:4

1:2 frente a 1:4

107,1

100,9

101,4

Tipo de muestra

Método Regresión lineal de mínimos cuadrados

106,3

1,80

1,09

0,993

Regresión lineal Suero/plasma 179 de ing-Bablok†

0,73

1,24

0,993

Sangre

124 - 4,23

1,32

0,997

Sangre

124 - 12,06

1,35

0,997

Regresión lineal de ing-Bablok†

103,2

Intervalos de concentración de las muestras analizadas para la correlación 103,1

104,3

Tipo de muestra

n

ARCHITECT Folate* ARCHITECT Folate

Suero/plasma Suero/plasma

179 179

ARCHITECT Folate* ARCHITECT Folate

Sangre Sangre

124 124

Ensayo Recuperación (%)*

=

Conc. media observada (ng/ml) x 100 Conc. media esperada (ng/ml)

Sensibilidad analítica (Límite de detección) La sensibilidad se define como el límite de detección. El límite del blanco (LoB) y el límite de detección (LoD) del ensayo ARCHITECT Folate se determinaron según el protocolo EP17-A18 del CLSI utilizando proporciones de falsos positivos (α) inferiores al 5% y falsos negativos (β) inferiores al 5%. El límite de detección del ensayo ARCHITECT Folate se diseñó para mostrar un límite del blanco inferior o igual a 0,8 ng/ml. Se realizó un estudio con un blanco (60 replicados) y una muestra con una concentración baja de folato (60 replicados); LoB=0,59 y LoD=1,19. * * Estos datos son orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios podrían ser distintos.

2,45 a 1,72 a

77,44 72,84

133,63 a 2 726,71 95,36 a 2 102,85

Apéndice A ARCHITECT i2000/i2000SR Realice este procedimiento diariamente (antes de procesar la carga máxima de análisis de folato) • Realice el procedimiento de mantenimiento según necesidad 2185 Wash Buffer Unload (descarga del tampón de lavado) para descargar el tampón de lavado de un módulo de procesamiento a un recipiente externo. Si desea información adicional, consulte el capítulo 9, Servicio y mantenimiento del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. Deseche el tampón del recipiente externo. ATENCIÓN: Por motivos de peso, NO intente levantar el recipiente externo si contiene más de 10 l de tampón de lavado. Descargue el tampón de lavado hasta que la cantidad restante sea igual o inferior a 10 l. • Extraiga el recipiente que contiene el tampón de lavado restante del centro de desechos y suministros sujetándolo por las asas laterales. • Desconecte y retire el sensor del nivel del tampón y conjunto de entrada y colóquelo sobre una superficie limpia. a. Presione la lengüeta de desconexión rápida conectada al filtro del tampón para extraer el tubo del conjunto de entrada [1]. b. Presione la lengüeta de desconexión rápida para extraer el tubo del sensor del nivel del tampón [2]. c. Desconecte el cable del sensor de nivel [3]. d. Afloje las tapas en la parte superior del recipiente [4]. e. Desmonte el sensor del nivel y el conjunto de entrada.

Reactividad cruzada del ensayo ARCHITECT Concentración (ng/ml) 481 90 100

Intervalo de concentración (ng/ml)

* Estandarizado con 03/178 de la OMS ** Los resultados de folato obtenidos en otros laboratorios podrían ser diferentes. † Método de regresión lineal sin suposiciones especiales sobre la distribución de las muestras y los errores de medida.20

Especificidad La especificidad del ensayo ARCHITECT Folate se determinó estudiando la reactividad cruzada con aminopterina, ácido folínico y metotrexato en muestras de suero humano procesado que contienen folato endógeno. Las concentraciones terapéuticas de estos fármacos pueden exceder en gran medida las concentraciones analizadas en este estudio, y es probable que interfiera con el ensayo ARCHITECT Folate.11 Los resultados de folato de este estudio se muestran en las tablas que aparecen a continuación: Sustancias con capacidad de interferir Aminopterina Ácido folínico Metotrexato

Coeficiente de correlación

Suero/plasma 179

Regresión lineal de mínimos cuadrados

103,3

n

Ordenada en Penel ori- diengen te

Reactividad cruzada (%) 1,2 - 0,3 1,1

Interferencias Se estudió la posible interferencia de la bilirrubina, los triglicéridos y las proteínas con el ensayo ARCHITECT Folate como se describe en el protocolo EP7-P del NCCLS.19 A muestras de suero humano con folato endógeno en el intervalo de valores de referencia se les añadió sustancias con capacidad de interferir. En este estudio el ensayo ARCHITECT Folate mostró el porcentaje de interferencia que se indica a continuación: • Bilirrubina < 10% a 20 mg/dl • Triglicéridos < 10% a 3 000 mg/dl • Proteína < 10% a 2 g/dl • Proteína < 10% a 12 g/dl Exactitud por correlación Se realizaron dos estudios de correlación comparando el ensayo ARCHITECT Folate* estandarizado con el ensayo ARCHITECT Folate. Uno de los estudios se realizó con muestras de suero o plasma y el otro con muestras de sangre. La siguiente tabla resume los resultados obtenidos en los estudios de correlación.**

8

14. Savage DS, Lindenbaum J, Stabler SP, et al. Sensitivity of serum methylmalonic acid and total homocysteine determinations for diagnosing cobalamin and folate deficiencies. Am J Med. 1994;96:239-246. 15. Klee GC. Cobalamin and folate evaluation: measurement of methylmalonic acid and homocysteine vs vitamin B12 and folate. Clin Chem 46;2000:1277-1283. 16. Fairbanks VF, Klee GC. Biochemical aspects of hematology. In Burtis CA, Ashwood ER (eds): Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd Edition, pp 1642-1710, Philadelphia, WB Saunders, 1999. 17. Clinical Laboratory Standards Institute. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. CLSI Document EP5-A2. August 2004. 18. Clinical Laboratory Standards Institute. Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline. CLSI Document EP17-A. October 2004. 19. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Interference Testing in Clinical Chemistry: Proposed Guideline: NCCLS Document EP7-P. Villanova, PA: NCCLS, 1986. 20. ing H, Bablok W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J lin Chem Clin Biochem 1983; 21:709-20. • • •

• •

• •

Deseche el tampón restante del recipiente externo. Limpie el interior del recipiente con aproximadamente 5 l de agua de tipo II CLSI. Deseche el agua. Limpie el exterior del sensor de nivel y el conjunto de entrada con agua CLSI de tipo II. Coloque el sensor de nivel y el conjunto de entrada en el recipiente de tampón y apriete las tapas. Conecte el tubo y el cable del sensor de nivel. Haga uso de las asas laterales del recipiente del tampón e introdúzcalo en el centro de desechos y suministros. Llénelo con tampón de lavado recién preparado. Llene por completo el recipiente de tampón de lavado para registrar de forma exacta el inventario de tampón de lavado. Si desea más información sobre el reabastecimiento del inventario de tampón de lavado, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. Realice el procedimiento de mantenimiento según necesidad 2130 Flush Fluids (purgado de los líquidos). Prosiga con el procesamiento del ensayo.

Las siguientes patentes estadounidenses afectan al ARCHITECT i System o a sus componentes. Existen otras patentes o componentes similares en EE.UU. y en todo el mundo. 5,468,646 5,543,524

2. 3. 4.

5. 6. 7. 8.

9.

10. 11. 12.

13.

5,669,819 5,783,699

Si desea más información, póngase en o con el Centro de Asistencia Técnica de Abbott Científica. Abbott Ireland Diagnostics Division Lisnamuck, Longford Co. Longford Ireland +353-43-31000 Noviembre 2007 © 2007 Abbott Laboratories / Printed in

BIBLIOGRAFÍA 1.

5,545,739 5,565,570

Steinberg SE. Mechanisms of folate homeostasis. Am J Physiol 1984; 246(9):G319-24. Appling DR. Compartmentation of folate-mediated one-carbon metabolism in eukaryotes. FASEB J 1991;5(12):2645-51. Burtis CA, Ashwood ER, eds. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders;1999:1693-5. Bagg A, Jacobson RJ. Pernicious anemia and other megaloblastic anemias. In: Conn RG, ed. Current Diagnosis. Philadelphia, PA: WB Saunders;1984:527-34. Kones R. Folic acid, 1991: an update, with new recommended daily allowances. South Med J 1990;83(12):1454-8. Mastropaola CS, Wilson MA. Effect of light on serum B12 and folate stability. Clin Chem 1993;39(5):913. Burtis CA, Ashwood ER, eds. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 2nd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders;1994:2056. Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, Goldbery DM, et al. “Sandwich”type immunoassay of carcinoembryonic antigen in patients receiving murine monoclonal antibody therapy. Clin Chem 1988;34:261-4. Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, Oldham RK, Morgan AC Jr, et al. Human anti-murine immunoglobulin responses in patients receiving monoclonal antibody therapy. Cancer Res 1985;45:879-85. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34:27-33. D.S. Young, Effects of drugs on clinical lab tests, 5th ed. AACC Press, Washington D.C. 2000; 1:3335-3336. Clinical Laboratory Standards Institute. How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline - Second Edition. CLSI Document C28-A2. August 2000. Snow CF. Laboratory diagnosis of vitamin B12 and folate deficiency: A guide for the primary care physician. Arch Intern Med. 1999;159:1289-1298.

9