Fitoterapi Toksisitas 5g6h2s

BAB I PENDAHULUAN Masyarakat Indonesia telah lama mengenal serta menggunakan obat-obatan alami atau yang dikenal dengan obat tradisional. Obat tradisional lebih mudah diterima oleh masyarakat karena selain telah akrab dengan masyarakat, obat ini lebih murah dan mudah didapat (Hyeronimus SB, 2006). Terdapat berbagai macam obat tradisional yang berasal dari tanaman dan telah banyak diteliti kandungan kimia dan khasiat yang berada di dalamnya. Namun masih banyak tanaman yang belum diketahui kadar toksisitasnya, sehingga perlu diteliti lebih lanjut (Agus D, 2008). Toksisitas dari suatu senyawa secara umum dapat diartikan kepada potensi dari suatu senyawa kimia untuk dapat menyebabkan kerusakan ketika senyawa tersebut mengenai atau masuk kedalam tubuh manusia. Suatu senyawa kimia dikatakan bersifat racun akut jika senyawa tersebut dapat menimbulkan efek racun dalam jangka waktu yang singkat, dan bersifat kronis jika senyawa tersebut dapat menimbulkan efek racun dalam jangka waktu yang panjang (karena kontak yang berulang-ulang walaupun dalam jumlah yang sedikit). Suatu bahan atau obat yang bersifat toksik dapat merusak organisme targetnya. Uji toksisitas terdiri dari dua macam yaitu uji toksisitas umum dan uji toksisitas khusus. Uji toksisitas umum dirancang untuk mengevaluasi keseluruhan efek umum suatu obat pada hewan uji melalui uji toksisitas akut, subkronis dan kronis. Uji toksisitas khusus seperti uji teratogenik, uji mutagenik dan uji karsinogenik (Lu, 2009). Uji toksisitas diperlukan untuk menilai keamanan suatu obat, maupun bahan yang dipakai sebagai suplemen ataupun makanan. Hal juga untuk melindungi masyarakat dari efek yang mungkin merugikan Efek toksik obat-obatan sering terlihat dalam hepar, dikarenakan hepar berperan sentral dalam memetabolisme semua obat dan bahan-bahan asing yang masuk tubuh. Hepar akan mengubah struktur obat yang lipofilik menjadi hidrofilik sehingga mudah dikeluarkan dari tubuh melalui urin atau empedu (Setiawan,dkk,2007). Ekskresi melalui empedu memungkinkan terjadinya penumpukan xenobiotik di hepar sehingga menimbulkan efek hepatotoksik (Donatus IO, 2007)

Untuk melakukan uji toksisitas umumnya menggunakan metode BSLT (Brine Shrimp Lethality Test). BSLT (Brine Shrimp Lethality Test)merupakan salah satu metode skrining bahan yang berpotensi sebagai tanaman berkhasiat. Metode penelitian ini menggunakan larva udang (Artemia salina Leach.) sebagai bioindikator. Larva udang ini merupakan organism sederhana dari biota laut yang sangat kecil dan mempunyai kepekaan yang cukup tinggi terhadap toksik (Parwati dan Simanjuntak, 1998).

BAB II PEMBAHASAN

Toksikologi Umum Uji toksikologi umum adalah berbagai uji yang dirancang untuk mengevaluasi efek umum suatu senyawa secara keseluruhan pada hewan uji. Uji yang termasuk dalam golongan ini, meliputi: 1. Uji Toksisitas Akut Uji toksisitas akut adalah uji toksisitas terhadap suatu senyawa yang diberikan dengan dosis tunggal pada hewan percobaan, yang diamati selama 24 jam atau selama 7-14 hari. Uji toksisitas akut adalah suatu pengujian untuk mendeteksi efek toksik yang muncul dalam waktu singkat setelah pemberian sediaan uji yang diberikan secara oral dalam dosis tunggal, atau dosis berulang yang diberikan dalam waktu 24 jam (BPOM RI, 2011). Prinsip uji toksisitas akut oral yaitu, sediaan uji dalam beberapa tingkat dosis yang diberikan pada beberapa kelompok hewan uji kemudian dilakukan pengamatan terhadap adanya efek toksik dan kematian sebagai parameter akhir (BPOM RI, 2011). a. Tujuan uji toksisitas akut yaitu: Tujuan toksisitas akut adalah untuk mendeteksi toksisitas dari suatu zat, untuk memperoleh informasi awal yang dapat digunakan untuk merancang uji toksisitas selanjutnya serta untuk menentukan LD50 (potensi ketoksikan) akut dari suatu senyawa (Priyanto, 2009; BPOM RI, 2011). Uji toksistas akut juga digunakan untuk menentukan jangkauan dosis letal dan berbagai efek senyawa terhadap berbagai fungsi penting tubuh (seperti gerak; tingkah laku; dan pernafasan) yang dapat dipergunakan sebagai indikator penyebab kematian hewan uji,  Menunjukkan organ sasaran yang mungkin dirusak dan efek toksik spesifiknya  Memberikan petunjuk tentang dosis yang sebaiknya digunakan.

b. Dosis dan jumlah hewan Uji LD50 adalah menetapkan dosis yang akan membunuh 50% hewan dan menentukan slope (kemiringan) kurva dosis vs respon.\ LD50 didefinisikan sebagai “dosis tunggal suatu bahan yang secara statistik diharapkan akan membunuh 50% hewan coba”.Pengujian ini juga dapat menunjukkan organ sasaran yang mungkin dirusak dan efek toksik spesifiknya, serta memberikan petunjuk tentang dosis yang sebaiknya digunakan dalam pengujian yang lebih lama (Lu, 1994).LD50 adalah dosis perkiraan ketika suatu zat diberikan langsung kepada hewan uji, menghasilkan kematian 50% dari populasi di bawah kondisi yang ditentukan dari tes (Hudgson dan Levi, 2004). Setelah perlakuan zat toksik, hewan harus diperiksa tidak hanya jumlah dan waktu kematian, tetapi juga saraf sentral, saraf otonom, dan pengaruh terhadap tingkah laku (termasuk reaksi awal, intensitas, dan lama reaksinya). Frekuensi pengaruh dosis harus dicatat untuk masing-masing kelompok dosis. c. Perhitungan LD50 dapat dilakukan dengan berbagai metode, yaitu: 

Miller dan Tainter (1945) : Metode statistic



Litchfield dan Wilcoxon (1949) : Normogram



Thomposon-Weil (Biometrics, 1952) : Menggunakan daftar dan jumlah hewan yang sedikit, dengan taraf kebenaran 95%.

d. Klasifikasi zat kimia berdasarkan toksisitas relatif. Klasifikasi umum sebagai berikut: Kategori LD50 (mg/kg) 1. Sangat tinggi <1 2. Tinggi 1-50 3. Sedang 50-500 4. Sedikit toksik 500-5000 5. Hampir tidak toksik 5000-15000 6. Relatif tidak toksik >15000

2. Uji Toksisitas Sub-kronik (Jangka Pendek) Uji ini dimaksudkan untuk mengungkapkan berbagai efek berbahaya yang dapat terjadi jika suatu senyawa digunakan selama waktu tertentu, selama waktu tertentu, serta untuk menunjukkan apakah berbagai efek tersebut berkaitan dengan dosis. Kegunaan uji toksisitas sub-kronik adalah untuk mengetahui efek samping dan kontraindikasi obat yang diuji. Uji ini dilakukan dengan memberikan bahan tersebut berulangulang, biasanya setiap hari atau lima kali seminggu, selama jangka waktu kurang lebih 10% dari masa hidup hewan; yaitu 3 bulan untuk tikus, dan 1 atau 2 tahun untuk anjing. Tetapi beberapa peneliti menggunakan jangka waktu yang lebih pendek, misalnya pemberian zat kimia selama 14 dan 28 hari. Tujuan toksisitas subkronik oral adalah untuk memperoleh informasi adanya efek toksik zat yang tidak terdeteksi pada uji toksisitas akut, informasi kemungkinan adanya efek toksik setelah pemaparan sediaan uji secara berulang dalam jangka waktu tertentu (OECD, 2008), untuk memberikan informasi dosis yang tidak menimbulkan efek toksik dan mempelajari adanya efek reversibilitas zat tersebut (BPOM RI, 2011). Prinsip uji toksisitas subkronik oral adalah sediaan uji dalam beberapa tingkat dosis diberikan setiap hari pada beberapa kelompok hewan uji dengan satu dosis per kelompok selama 28 atau 90 hari (OECD, 2008), bila diperlukan ditambahkan kelompok satelit untuk melihat adanya efek yang bersifat reversibel (BPOM RI, 2011). Studi subkronik dapat dilakukan pada tikus dan mencit dengan rute pemberian yang lazim yaitu oral.Sekurang-kurangnya digunakan tiga kelompok dosis yang berbeda, 1 kelompok kontrol dan 2 kelompok satelit (kelompok dosis tinggi dan kelompok kontrol).Dosis sediaan uji yang paling tinggi harus menimbulkan efek toksik tetapi tidak menimbulkan kematian atau gejala toksik yang berat, dosis menengah menimbulkan gejala toksik yang lebih ringan sedangkan dosis yang paling rendah tidak menimbulkan gejala toksik (BPOM RI, 2011). Parameter efek toksik adalah mortalitas, pertambahan berat badan, berat organ relatif, konsumsi makanan dan minuman, uji laboratorium klinik, serta gambaran histopatologi organ.Berat badan dan konsumsi makanan diukur setiap minggu.Berkurangnya pertambahan

berat badan merupakan indeks efek toksik yang sederhana namun sensitif.Konsumsi makanan juga merupakan indikator yang berguna, konsumsi makanan yang nyata berkurang dapat menimbulkan efek yang mirip manifestasi toksik suatu zat (BPOM RI, 2011).Uji laboratorium klinik

biasanya

mencakup

pemeriksaan

hematologi,

biokimia

klinis

dan

histopatologi.Disamping itu, berat relatif organ harus diukur karena merupakan indikator yang berguna bagi toksisitas (Lu, 1994). a. Jenis Hewan Uji Sekurang-kurangnya digunakan dua jenis hewan, hewan pengerat dan bukan hewan pengerat. Biasanya dapat digunakan tikus dan anjing, dari dua jenis kelamin, sehat, dewasa, umur 5 sampai 6 minggu untuk tikus, dan 4-6 bulan untuk anjing. b. Jumlah Hewan Uji Masing-masing kelompok terdiri dari 10 ekor hewan pengerat atau empat ekor anjing

untuk

setiap

jenis

kelamin.

Bila

pada

percobaan

akan

dilakukan

pengorbanan/pembedahan, maka jumlah hewan uji harus sudah dipertimbangkan sebelumnya. c. Dosis Uji Sekurang-kurangnya digunakan tiga kelompok dosis dan satu kelompok kontrol untuk setiap jenis kelamin. Dosis dan jumlah kelompok dosis harus cukup, hingga dapat diperoleh dosis toksik dan dosis tidak berefek. Dosis toksik harus menyebabkan gejala toksik yang nyata pada beberapa hewan uji dan terjadinya kematian tidak boleh lebih dari 10%, sedang dosis tidak berefek tidak boleh menyebabkan gejala toksik. Sebagai dosis toksik biasanya digunakan 10-20% dari harga LD50, dengan mempertimbangkan hasil yang diperoleh pada uji pendahuluan, tingkat dosis lain ditetapkan dengan faktor perkalian tetap 2 sampai 10. d. Cara Pemberian Zat Uji Pada dasarnya zat uji harus diberikan sesuai dengan cara pemberian atau pemaparan yang diharapkan pada manusia. Bila diberikan secara oral, dapat diberikan dengan cara pencekokan menggunakan sonde atau secara ad libitum di dalam makanan atau minuman hewan. Bila zat uji akan dicampur dengan makanan atau minuman hewan,

jumlah zat uji yang ditambahkan harus diperhitungkan berdasarkan jumlah makanan atau minuman yang dikonsumsi setiap hari. e. Lama Pemberian Zat Uji Lama pemberian zat uji selama 28 sampai 90 hari atau 10% dari seluruh umur hewan, diberikan tujuh hari dalam satu minggu. 3. Uji Toksisitas Kronik (Jangka Panjang) Pada dasarnya uji toksisitas kronik sama dengan toksisitas sub-akut. Perbedaannya hanya terletak pada lamanya pemberian dosis dan masa pengamatannya. Percobaan jenis ini mencakup pemberian obat secara berulang selama 3–6 bulan atau seumur hewan, misalnya 18 bulan untuk mencit, 24 bulan untuk tikus, dan 7–10 tahun untuk anjing dan monyet. Memperpanjang percobaan kronik untuk lebih dari 6 bulan tidak akan bermanfaat, kecuali untuk percobaan karsinogenik. Umumnya satu atau lebih jenis binatang yang digunakan. Kecuali tidak ditunjukkan, tikuslah yang digunakan, anjing dan primata merupakan pilihan berikutnya. Karena ukurannya yang kecil, tikus tidak cocok digunakan dalam studi toksisitas jangka panjang, meskipun mereka sering digunakan dalam studi karsinogenesitas. Jantan dan betina dalam jumlah yang sama digunakan. Umumnya 40-100 tikus ditempatkan dalam kelompok masing-masing dosis dan juga dalam kelompok kontrol. Penggunaan anjing dan primata non manusia jauh lebih sedikit.

Toksisitas khusus 1. Uji teratogenik Uji teratogenik adalah suatu pengujian untuk memperoleh informasi adanya abnormalitas fetus yang terjadi karena pemberian suatu zat dalam masa perkembangan embrio (Priyanto, 2009). Prinsip pengujian ini senyawa uji dalam beberapa tingkat dosis diberikan kepada beberapa kelompok hewan hamil selama paling sedikit masa organogenesis dari kehamilan, satu dosis untuk satu kelompok. Sesaat sebelum waktu melahirkan, uterus diambil dan dilakukan evaluasi terhadap fetus (OECD, 2008). Uji keteratogenikan merupakan salah satu jenis uji ketoksikan yang khas, karena uji keteratogenikan ini meupakan uji ketoksikan sesuatu obat yang diberikan atau digunakan selama masa organogenesis dari sesuatu jenis hewan bunting. Pengujian ini dilakukan karena bertujuan untuk menentukan apakah sesuatu obat dapat menyebabkan kelainan atau cacat bawaan pada diri janinyang dikandung oleh hewan bunting. Oleh karena itu, uji keteratogenikan sangat perlu untuk dilakukan, karena uji ini sangat bermanfaat sekali sebagai landasan evaluasi terhadap batas aman dan resiko penggunaan suatu obat oleh wanita yang hamil, terutama yang berkaitan dengan janin yang sedang dikandungnya. Pengujian keteratogenikan suatu agensia melalui uji toksikologi perkembangan semakin penting saat ini ketika lingkungan hidup kita sehari-hari dimasuki oleh agensiaagensia baru berpotensi toksis yang jumlah dan macamnya terus melimpah. Agensia baru itu dapat berupa obat-obatan, bahan-bahan aditif untuk makanan, bahan pencemar di lingkungan industri, pestisida, logam-logam berat, pelarutpelarut organik, gelombang elektromagnetik, bunyi, temperatur ekstrim, dan lainlain. Apabila embrio yang sedang berkembang terpajan pada agensia tadi ada peluang proses perkembangannya menjadi tergganggu.

2. Uji mutagenik Uji mutagenik adalah uji yang dilakukan untuk memperoleh informasi mengenai kemungkinan terjadinya efek mutagenik suatu senyawa. Efek mutagenik merupakan efek yang menyebabkan terjadinya perubahan pada sifat genetika sel tubuh makhluk hidup (Loomis, 1978). Tujuan dan sasaran uji Uji karsinogen

mutagenitas ditujukan untuk

mempelajari lebih

lanjut cara

kerja

dalam individu. Dalam perkembanganya uji ini lebih banyak dipergunakan

karena nilainya sebagai suatu penyaring cepat untuk karsinogenisitas terutama dengan fakta bahwa sebagian besar mutagen terbukti bersifat karsinogen. 3. Uji karsinogenik Uji karsinogenik adalah uji yang dilakukan untuk memperoleh informasi mengenai efek korsinogenik suatu senyawa pada hewan percobaan (Lu, 1994) dan untuk mengetahui apakah zat jika dipakai dalam jangka panjang akan dapat menimbulkan kanker (Priyanto, 2009). Tujuan dan sasaran uji Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh informasi pasti tentang efek karsinogenik berbagai zat kimia pada hewan coba( Frank, 2006 ). Metode BSLT BSLT (Brine Shrimp Lethality Test) merupakan salah satu metode skriningbahan yang berpotensi

sebagai

tanaman

berkhasiat.

Metode

penelitian

ini

menggunakan

larva

udang (Artemia salina Leach.) sebagai bioindikator. Larva udang ini merupakan organism sederhana dari biota laut yang sangat kecil dan mempunyai kepekaan yang cukup tinggi terhadap toksik (Parwati dan Simanjuntak, 1998). Telurnya memiliki daya tahan hidup selama beberapa tahun dalam keadaan kering. Telur udang dalam air laut akan menetas menjadi larva (nauplii) dalam waktu 24 – 28 jam (Pujiati et al., 2002). Bila bahan yang diuji memberikan efek toksik terhadap larva udang, maka hal ini

merupakan indikasi awal dari efek farmakologi yang terkandung dalam bahan tersebut. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa A. salina memiliki korelasi positif terhadap ekstrak yang bersifat bioaktif. Metoda ini juga banyak digunakan dalam berbagai analisis biosistim seperti analisis terhadap residu pestisida, miko toksin, polusi, senyawa turunan morfin, dan karsinogenik dari phorbol ester (Meyer et al., 1982). Penetasan Larva Udang Sebanyak 10 mg telur udang A. salina ditambah 100 mL air laut yang telah disaring.Selanjutnya diberi pencahayaan lampu TL selama 48 jam sampai telur udang A. salina menetas sempurna dan siap diujicobakan. Uji Toksisitas terhadap Larva A. salina Masing-masing

sampel

kemudian

dipipet

sebanyak

100

μL

dan

diletakkan

dalam mikroplate, kemudian ditambah 10 μL air laut yang berisi 10 larva udang pada setiap sampel sehingga volume sampel menjadi setengahnya (1.000 ppm; 500 ppm; 250 ppm; 125 ppm; 62,5 ppm; 31,2 ppm; 15,6 ppm; 7,8 ppm). Jumlah larva udang yang mati dan hidup dihitung setelah 24 jam. Kontrol dikerjakan sama dengan perlakuan sampel, tetapi tanpa penambahan ekstrak. Ekstrak sampel yang sukar larut dapat ditambahkan DMSO 1% satu sampai tiga tetes (Kadarisman, 2000; Sutisna, 2000).

BAB III PENUTUP

A. KESIMPULAN 1. Toksisitas dari suatu senyawa secara umum dapat diartikan kepada potensi dari suatu senyawa kimia untuk dapat menyebabkan kerusakan ketika senyawa tersebut mengenai atau masuk kedalam tubuh manusia. Suatu senyawa kimia dikatakan bersifat racun akut jika senyawa tersebut dapat menimbulkan efek racun dalam jangka waktu yang singkat, dan bersifat kronis jika senyawa tersebut dapat menimbulkan efek racun dalam jangka waktu yang panjang (karena kontak yang berulang-ulang walaupun dalam jumlah yang sedikit). 2. Suatu bahan atau obat yang bersifat toksik dapat merusak organisme targetnya. Uji toksisitas terdiri dari dua macam yaitu uji toksisitas umum dan uji toksisitas khusus. Uji toksisitas umum dirancang untuk mengevaluasi keseluruhan efek umum suatu obat pada hewan uji melalui uji toksisitas akut, subkronis dan kronis. Uji toksisitas khusus seperti uji teratogenik, uji mutagenik dan uji karsinogenik 3. Uji toksisitas terdiri dari dua yaitu uji toksisitas umum ( uji toksisitas akut, kronis, dan sub kronis ) dan uji toksisitas khusus ( uji toksisitas teratogenik, mutagenic dan karsinogenik )

TUGAS

FITOTERAPI “ TOKSISITAS BAHAN ALAM ”

OLEH Sitti Sunawia Sulistiawati Feby Fahriani Nurhayati I Gede Sukrawan Ita Riswati

Nanang Epriana Sari Fachriansyah Junaedy Wawan Irwanto Niluh Yeniati

S1 – FARMASI STIKES MANDALA WALUYA KENDARI 2017